Preparo de solução estoque de Tris-Cl
Este guia descreve o preparo de uma solução estoque de Tris-Cl em uma molaridade definida para uso em laboratório.
Guia de preparo de solução estoque – Tampão Tris (1 M, pH 7.2)
Tris (tris(hidroximetil)aminometano), também conhecido como Trizma ou THAM, é um tampão biológico amplamente usado em biologia molecular e bioquímica. Possui pKa de ~8.08 a 25 °C e faixa efetiva de tamponamento entre ~7.2 e 9.0, sendo adequado para aplicações em pH fisiológico. O pH da solução depende da temperatura e deve ser ajustado na temperatura prevista de uso.
Informações químicas
| Nome | Fórmula molecular | Massa molecular | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris base | C₄H₁₁NO₃ | 121.14 g/mol | 77-86-1 |
Aplicações
- Tamponamento biológico geral entre pH 7.2–9.0
- Preparo de tampões TAE, TBE e TE
Solubilidade e manuseio
- Tris base é um pó branco que se dissolve facilmente em água.
- Como o pH muda com a temperatura, ajustá-lo na temperatura em que o tampão será usado.
Preparo de Tris.Cl a 1 M (pH 7.2)
- Pesar 121.14 g de Tris base e transferir para um béquer ou frasco de 1 L.
- Adicionar ~800 mL de água deionizada e dissolver sob agitação.
- Se a solução foi aquecida, deixar resfriar à temperatura ambiente. Não ajustar o pH enquanto estiver quente.
- Adicionar lentamente HCl concentrado, agitando e monitorando o pH. Deixar a solução retornar à temperatura prevista para o ajuste do pH antes de realizar o ajuste final para pH 7.2. Determinar a quantidade de HCl pelo pH medido, não por um volume fixo.
- Transferir para uma proveta graduada de 1 L e ajustar o volume final para 1000 mL com água deionizada.
- Opcional: autoclavar por 20 min a 15 psi se for necessário um tampão estéril.
Armazenamento e notas
- Tris.Cl a 1 M e pH 7.2 é límpido e incolor; descartar se estiver amarelado.
- Armazenar à temperatura ambiente por várias semanas.
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