Preparo de solução estoque de PIPES
Este guia descreve o preparo de uma solução estoque de PIPES em uma molaridade definida para uso em laboratório.
Guia de preparo de solução estoque – PIPES
PIPES (ácido piperazina-N,N′-bis(2-etanossulfônico) e suas formas de sais de sódio são tampões de Good zwitteriônicos comumente usados em experimentos de bioquímica e biologia celular. PIPES atua eficazmente na faixa de pH de aproximadamente 6.1–7.5 e apresenta interação mínima com íons metálicos divalentes, sendo adequado para aplicações de tamponamento nas quais a neutralidade iônica é importante.
Informações químicas
- Número CAS: 5625-37-6
- Fórmula molecular: C₈H₁₈N₂O₆S₂
- Formas salinas comuns: PIPES·2Na, PIPES·Na, PIPES·1.5Na, PIPES (ácido livre)
- Massas moleculares: Variam conforme a forma salina (por exemplo, ácido livre 302.38 g/mol, sal dissódico 346.33 g/mol). Consulte a lista de reagentes para detalhes.
Propriedades e usos do tampão
- PIPES é um tampão biológico zwitteriônico com capacidade útil de tamponamento de pH em condições próximas da neutralidade.
- Não quela significativamente íons metálicos, sendo útil para experimentos com cátions divalentes.
- Usado na purificação de proteínas, cromatografia, meios de cultura celular e soluções de fixação para microscopia.
Solubilidade e manuseio
- A forma de ácido livre tem solubilidade limitada em água e geralmente requer ajuste de pH com NaOH para dissolver eficazmente.
- As formas de sais de sódio são mais solúveis e práticas para o preparo direto do tampão.
- As soluções tampão PIPES podem ser esterilizadas por filtração se necessário para cultura celular.
Preparo da solução estoque
Para preparar uma solução estoque de tampão PIPES com molaridade específica:
Para 1 L de tampão PIPES a 1.0 M (ácido livre):
• Adicionar 302.37 g de PIPES ácido livre a ~800 mL de água deionizada.
• Adicionar lentamente NaOH (por exemplo, 5–10 N) sob agitação para dissolver e ajustar ao pH desejado (geralmente ~6.8).
• Após dissolver e ajustar o pH, completar com água até o volume final de 1 L.
• Adicionar 302.37 g de PIPES ácido livre a ~800 mL de água deionizada.
• Adicionar lentamente NaOH (por exemplo, 5–10 N) sob agitação para dissolver e ajustar ao pH desejado (geralmente ~6.8).
• Após dissolver e ajustar o pH, completar com água até o volume final de 1 L.
Como alternativa, misturar quantidades equimolares dos sais monossódico e dissódico de PIPES e titular até o pH desejado.
Armazenamento e uso
- Armazenar os reagentes PIPES sólidos em local seco à temperatura ambiente; as soluções tampão podem ser armazenadas sob refrigeração.
- Esterilizar as soluções tampão por filtração quando necessário para aplicações biológicas sensíveis.
Reagentes disponíveis
| Nome | Fórmula molecular | Massa molecular (g/mol) | CAS |
|---|---|---|---|
| PIPES·2Na | C₈H₁₆N₂O₆S₂Na₂ | 346.33 | 76836-02-7 |
| PIPES·Na | C₈H₁₇N₂O₆S₂Na | 324.35 | 10010-67-0 |
| PIPES·1.5Na | C₈H₁₆.₅N₂O₆S₂Na₁.₅ | 335.34 | 100037-69-2 |
| PIPES (ácido livre) | C₈H₁₈N₂O₆S₂ | 302.38 | 5625-37-6 |
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