Herstellung einer PIPES-Stammlösung

Anleitung zur Herstellung einer Stammlösung – PIPES

PIPES (Piperazin-N,N′-bis(2-ethansulfonsäure) und seine Natriumsalzformen sind zwitterionische Good-Puffer, die häufig in biochemischen und zellbiologischen Experimenten eingesetzt werden. PIPES ist im pH-Bereich von etwa 6.1–7.5 wirksam und wechselwirkt nur minimal mit zweiwertigen Metallionen, wodurch es für Pufferanwendungen geeignet ist, bei denen Ionenneutralität wichtig ist.

Chemische Angaben

• CAS-Nummer: 5625-37-6
• Summenformel: C₈H₁₈N₂O₆S₂
• Gängige Salzformen: PIPES·2Na, PIPES·Na, PIPES·1.5Na, PIPES (freie Säure)
• Molekülmassen: Je nach Salzform unterschiedlich (z. B. freie Säure 302.38 g/mol, Dinatriumsalz 346.33 g/mol). Einzelheiten siehe Reagenzienliste.

Puffereigenschaften und Verwendung

• PIPES ist ein zwitterionischer biologischer Puffer mit nützlicher pH-Pufferkapazität nahe neutralen Bedingungen.
• Es chelatisiert Metallionen nicht wesentlich, was für Experimente mit zweiwertigen Kationen nützlich ist.
• Verwendet bei Proteinreinigung, Chromatographie, Zellkulturmedien und Fixierlösungen für die Mikroskopie.

Löslichkeit und Handhabung

• Die freie Säure ist in Wasser nur begrenzt löslich und erfordert zur wirksamen Auflösung üblicherweise eine pH-Einstellung mit NaOH.
• Die Natriumsalzformen sind besser löslich und für die direkte Pufferherstellung praktisch.
• PIPES-Pufferlösungen können bei Bedarf für die Zellkultur durch Filtration sterilisiert werden.

Herstellung der Stammlösung

Zur Herstellung einer PIPES-Pufferstammlösung mit bestimmter Molarität:

Alternativ äquimolare Mengen der Mono- und Dinatriumsalze von PIPES mischen und auf den gewünschten pH titrieren.

Lagerung und Verwendung

• Feste PIPES-Reagenzien trocken bei Raumtemperatur lagern; Pufferlösungen können gekühlt gelagert werden.
• Pufferlösungen bei Bedarf für empfindliche biologische Anwendungen sterilfiltrieren.

Verfügbare Reagenzien