PIPES ストック溶液の調製

本ガイドでは、実験室で使用する所定モル濃度のストック溶液の調製方法を説明します。

ストック溶液調製ガイド - PIPES

PIPES(Piperazine-N,N′-bis(2-ethanesulfonic acid))およびそのナトリウム塩は、 生化学・細胞生物学実験で広く使われる両性イオン性 Good's buffer です。 おおよそ pH 6.1–7.5 の範囲で有効に機能し、二価金属イオンとの相互作用が小さいため、 金属イオン環境への影響を抑えたい系に適しています。

化学情報

  • CAS 番号: 5625-37-6
  • 分子式: C₈H₁₈N₂O₆S₂
  • 主な塩形: PIPES·2Na、PIPES·Na、PIPES·1.5Na、PIPES(遊離酸)
  • 分子量: 塩形により異なります(例: 遊離酸 302.38 g/mol、二ナトリウム塩 346.33 g/mol)。 詳細は下記試薬表を参照してください。

緩衝液としての特性と用途

  • PIPES は中性付近で有用な緩衝能を示す両性イオン性バッファーです。
  • 金属イオンを強くキレートしないため、二価陽イオンを含む実験系で扱いやすい特性があります。
  • タンパク質精製、クロマトグラフィー、細胞培養培地、顕微鏡用固定液などに利用されます。

溶解性と取り扱い

  • 遊離酸は水への溶解性が低く、通常は NaOH で pH を調整しながら溶解させます。
  • ナトリウム塩形は溶解性が高く、直接バッファー調製に向いています。
  • 細胞培養用途では、必要に応じてろ過滅菌が可能です。

ストック溶液の調製

指定モル濃度の PIPES バッファーストックを調製する例:

1.0 M PIPES(遊離酸)を 1 L 調製する場合:
• PIPES 遊離酸 302.37 g を脱イオン水約 800 mL に加えます。
• 攪拌しながら NaOH(例: 5–10 N)を少しずつ加え、溶解と pH 調整(一般的に約 6.8)を行います。
• 完全溶解し pH 調整後、水を加えて最終体積を 1 L にします。

あるいは、PIPES 一ナトリウム塩と二ナトリウム塩を等モルで混合し、目標 pH まで滴定して調製する方法もあります。

保存と使用

  • 固体試薬は乾燥状態で室温保存し、調製後のバッファーは必要に応じて冷蔵保存します。
  • 感受性の高い生物学用途では、ろ過滅菌した溶液の使用を推奨します。

使用可能な試薬

名称分子式分子量 (g/mol)CAS
PIPES·2NaC₈H₁₆N₂O₆S₂Na₂346.3376836-02-7
PIPES·NaC₈H₁₇N₂O₆S₂Na324.3510010-67-0
PIPES·1.5NaC₈H₁₆.₅N₂O₆S₂Na₁.₅335.34100037-69-2
PIPES (Free Acid)C₈H₁₈N₂O₆S₂302.385625-37-6
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