원액 조제 가이드 - Tris 버퍼 (1 M, pH 7.2)
Tris(Tris(hydroxymethyl)aminomethane, Trizma/THAM)는 분자생물학과 생화학에서 널리 쓰이는 생물학적 버퍼입니다. 25 °C에서 pKa는 약 8.08이며 유효 완충 범위는 약 pH 7.2-9.0으로, 생리적 pH 조건에 적합합니다. 용액의 pH는 온도 의존성이 크므로 실제 사용 온도에서 조정해야 합니다.
화학 정보
| 명칭 | 분자식 | 분자량 | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris Base | C₄H₁₁NO₃ | 121.14 g/mol | 77-86-1 |
용도
- pH 7.2-9.0 범위의 일반 생물학적 완충
- TAE, TBE, TE 버퍼 조제
용해성 및 취급
- Tris 염기는 흰색 분말이며 물에 잘 용해됩니다.
- pH가 온도에 따라 변하므로 버퍼를 사용할 온도에서 pH를 맞추세요.
1 M Tris.Cl (pH 7.2) 조제
- Tris 염기 121.14 g을 칭량해 1 L 비커 또는 플라스크에 넣습니다.
- 탈이온수 약 800 mL를 넣고 교반해 용해합니다.
- 가온했다면 실온까지 냉각한 뒤 pH를 조정합니다. 뜨거운 상태에서 pH를 맞추지 마세요.
- 농염산(약 45 mL)을 천천히 넣으며 pH를 측정해 7.2가 되도록 조정합니다.
- 1 L 용기로 옮겨 탈이온수로 최종 부피를 1000 mL로 맞춥니다.
- 선택: 무균 버퍼가 필요하면 15 psi에서 20분 오토클레이브 멸균합니다.
보관 및 참고
- 1 M Tris.Cl pH 7.2 용액은 무색투명이 정상이며, 황변 시 폐기하세요.
- 실온에서 수주간 보관 가능합니다.
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