원액 조제 가이드 - HEPES 버퍼
HEPES(4-(2-Hydroxyethyl)piperazine-1-ethanesulfonic acid)는 세포생물학 및 생화학 연구에서 널리 사용되는 양쪽성 Good 계열 버퍼입니다. 25 °C에서 pKa가 약 7.5이며 pH 6.8-8.2 범위에서 우수한 완충능을 보여, 생리적 pH 조건에 적합합니다. 또한 금속 이온 결합이 낮고 물에 대한 용해도가 높습니다.
화학 정보
| 명칭 | 분자식 | 분자량 | CAS |
|---|---|---|---|
| HEPES (Free Acid) | C₈H₁₈N₂O₄S | 238.30 g/mol | 7365-45-9 |
| HEPES·Na | C₈H₁₇N₂O₄S·Na | 260.29 g/mol | 75277-39-3 |
| HEPES·0.5Na | C₈H₁₇.₅N₂O₄S·0.5Na | 249.30 g/mol | 103404-87-1 |
응용 분야
- 세포배양 및 생화학 분석용 생물학적 버퍼
- 용액의 생리적 pH 유지
- 효소 분석 및 전기영동에 사용
1 M HEPES 원액 조제 (pH ~7.5)
아래는 1 M HEPES 버퍼 원액의 일반적인 조제 절차입니다:
- HEPES(free acid) 238.30 g을 칭량합니다.
- 적절한 용기에 탈이온수 약 800 mL를 넣고 교반을 시작합니다.
- 보정된 pH meter로 확인하면서 강염기(예: 10 N NaOH)를 천천히 넣고, 교반 상태에서 pH가 목표값(예: ~7.5)에 도달할 때까지 조정합니다.
- pH 조정 후 1 L 눈금실린더로 옮기고, 탈이온수로 최종 부피를 1 L로 맞춥니다.
- 무균 용도에서는 필요 시 0.22 µm 필터로 멸균 여과합니다.
취급 및 보관
- HEPES 원액은 맑고 무색입니다. 단기 보관은 4 °C 또는 실온에서 가능합니다.
- 작업용 버퍼는 원액을 원하는 농도(예: 10-25 mM)로 희석해 사용하세요.
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