Préparation du tampon MOPS
Ce guide décrit la préparation d'un tampon MOPS à une molarité définie pour une utilisation en laboratoire.
Le tampon MOPS est un système tampon zwitterionique couramment utilisé en biologie moléculaire, notamment pour les applications liées à l’ARN, grâce à son pouvoir tampon efficace près du pH neutre et à sa faible capacité de liaison aux métaux.
Tampon MOPS – Composition de la solution de travail 1X
| Nom | Formule | Concentration (1X) | CAS |
|---|---|---|---|
| MOPS | C₇H₁₅NO₄S | 20 mM | 1132-61-2 |
| Acétate de sodium | C₂H₃O₂Na | 5 mM | 127-09-3 |
| EDTA | C₁₀H₁₆N₂O₈ | 1 mM | 60-00-4 |
Applications du tampon MOPS
Le tampon MOPS est largement utilisé en biologie moléculaire, notamment pour l’électrophorèse de l’ARN (par exemple sur gels d’agarose dénaturants), la manipulation de l’ARN et les réactions enzymatiques nécessitant un tamponnage stable près de pH 7.0. Sa faible interaction avec les ions métalliques et sa faible absorbance UV le rendent adapté aux applications sensibles en biochimie et en analyse des acides nucléiques.
Conseils de préparation, stérilisation et conservation
- Avant d’ajuster le pH, ne le mesurer qu’une fois tous les composants complètement dissous. Utiliser généralement du NaOH lors d’une préparation avec du MOPS sous forme d’acide libre, et de l’acide acétique avec le sel de sodium du MOPS.
- L’autoclavage n’est pas recommandé, car les températures élevées peuvent faire jaunir la solution.
- Les solutions fraîchement préparées sont incolores et transparentes. Une coloration jaune pâle apparaissant avec le temps n’affecte pas leur utilisation ; jeter la solution si la couleur s’assombrit.
- L’acétate de sodium anhydre est hygroscopique. Éviter une exposition prolongée pendant la pesée.
- L’EDTA (acide libre) est extrêmement difficile à dissoudre et nécessite des conditions alcalines. Il est recommandé de préparer une solution mère d’EDTA ; préférer une solution d’EDTA ou l’EDTA·2Na·2H₂O.
- Pour les applications liées à l’ARN, effectuer un traitement au DEPC tout au long du processus de préparation.
- Stérilisation : filtration à 0.22 μm.
- Conservation : 4°C dans un flacon ambré.
