Préparation du tampon TBE
Ce guide décrit la préparation d'un tampon Tris-borate-EDTA à une molarité définie pour une utilisation en laboratoire.
Le tampon Tris-borate-EDTA (TBE) est un tampon d'électrophorèse couramment utilisé pour l'analyse des acides nucléiques, particulièrement adapté à la séparation de petits fragments d'ADN.
Tampon Tris-borate-EDTA (TBE) – Composition de la solution de travail 1X
| Nom | Formule | Concentration (1X) | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris base | C₄H₁₁NO₃ | 89 mM | 77-86-1 |
| Borate | H₃BO₃ | 89 mM | 10043-35-3 |
| EDTA | C₁₀H₁₆N₂O₈ | 2 mM | 60-00-4 |
Applications du tampon Tris-borate-EDTA (TBE)
Le tampon TBE est largement utilisé pour l'électrophorèse de l'ADN sur gels d'agarose et de polyacrylamide. Par rapport au tampon TAE, il offre un pouvoir tampon plus élevé et un pH plus stable lors d'électrophorèses prolongées. Il permet une meilleure résolution des petits fragments d'ADN et est couramment utilisé pour déterminer la taille de l'ADN, analyser les fragments de restriction et réaliser des électrophorèses à haute résolution.
Conseils de préparation, stérilisation et conservation
- L'utilisation d'une solution d'EDTA ou d'EDTA·2Na·2H₂O est recommandée.
- Certaines études ont montré que les tampons préparés avec de l'EDTA (acide libre) génèrent moins de chaleur pendant l'électrophorèse, mais nécessitent un temps de préparation plus long.
- L'EDTA (acide libre) est extrêmement difficile à dissoudre. Il est recommandé de préparer d'abord une solution mère d'EDTA.
- Si une petite quantité de précipité se forme, elle peut être redissoute en plaçant la solution dans un bain-marie à 37°C, sans compromettre son utilisation. Si le précipité persiste après ce traitement, jeter la solution.
- Stérilisation : généralement non nécessaire ; à choisir selon les besoins.
- Conservation : température ambiante.
Aperçu
