Préparation d'une solution mère de acétate de sodium

Guide de préparation de solution mère – Tampon acétate de sodium (C₂H₃O₂Na) à 3 M, pH 5.2

L’acétate de sodium est un sel de sodium de l’acide acétique, facilement soluble dans l’eau. Les formes anhydre et hydratée peuvent être utilisées pour préparer un tampon très concentré. Un tampon acétate de sodium à 3 M (pH 5.2) est couramment utilisé en biologie moléculaire pour précipiter les acides nucléiques et pour d’autres applications.

Objectif

Préparation de 100 mL de tampon acétate de sodium à 3 M, pH 5.2.

Composition

• Tampon acétate de sodium à 3 M (pH 5.2)

Matériel nécessaire

• Acétate de sodium anhydre ou trihydraté
• Acide acétique glacial (pour ajuster le pH)
• Eau désionisée ou distillée
• Balance analytique
• Bécher ou Erlenmeyer
• Fiole jaugée ou éprouvette graduée
• Baguette d’agitation ou agitateur magnétique
• pH-mètre ou indicateur de pH
• Équipements de protection individuelle (gants, lunettes, blouse)

Procédure

• Étape 1
  Peser précisément la quantité appropriée d’acétate de sodium. Pour préparer 100 mL de tampon à 3 M avec de l’**acétate de sodium anhydre (masse moléculaire = 82.03)**, peser **24.61 g**. Avec le trihydrate (masse moléculaire = 136.08), peser une quantité proportionnellement supérieure (~40.82 g).
• Étape 2
  Placer le solide pesé dans un bécher contenant ~80 mL d’eau désionisée/distillée et agiter jusqu’à dissolution complète.
• Étape 3
  Ajuster le pH à **5.2** en ajoutant de l’acide acétique glacial goutte à goutte sous agitation, en contrôlant avec un pH-mètre étalonné à température ambiante.
• Étape 4
  Transférer la solution dans une fiole jaugée de 100 mL, y ajouter l’eau de rinçage du bécher et compléter avec de l’eau désionisée jusqu’au volume final de **100 mL**. Bien mélanger.
• Étape 5 (facultative)
  Stériliser à l’autoclave ou filtrer sur une membrane de **0.22 µm** si nécessaire pour les applications biologiques.

Remarque : L’acétate de sodium anhydre est hygroscopique et peut absorber l’humidité de l’air, rendant la pesée précise difficile ; envisager le trihydrate pour plus de précision. Étiqueter le récipient avec la concentration, le pH et la date. Conserver le tampon à température ambiante.

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