Préparation d'une solution mère de MOPS

Guide de préparation des solutions mères – Tampon MOPS (1 M, pH 7.4)

Le MOPS (acide 3-(N-morpholino)propanesulfonique) est un tampon biologique zwitterionique dont la plage de pH utile est d’environ 6.5–7.9. Il est soluble dans l’eau et couramment utilisé dans les dosages biochimiques, les milieux de culture cellulaire et les applications de purification des protéines.

Objectif

Préparation de 500 mL de solution mère de tampon MOPS à 1 M, pH 7.4.

Composition

• Tampon MOPS à 1 M (C₇H₁₅NO₄S) ajusté à pH 7.4

Matériel nécessaire

• MOPS (acide libre, MW = 209.26 g/mol)
• Eau déionisée / Milli-Q
• NaOH à 10 N pour ajuster le pH
• Éprouvette graduée
• Fiole Erlenmeyer ou bécher
• Agitateur magnétique
• Unité de filtration stérile de 0.22 µm pour la stérilisation
• EPI : gants, lunettes, blouse

Procédure

• Étape 1
  Peser **104.63 g** de MOPS sous forme d’acide libre et ajouter à ~400 mL d’eau déionisée dans un Erlenmeyer. Agiter jusqu’à dissolution complète.
• Étape 2
  Ajouter lentement du **NaOH à 10 N** en surveillant avec un pH-mètre étalonné pour ajuster la solution à **pH 7.4**.
• Étape 3
  Une fois le pH souhaité atteint, compléter le volume à **500 mL** avec de l’eau déionisée et bien mélanger.
• Étape 4
  Stériliser par filtration sur une membrane de **0.22 µm** dans un récipient stérile. L’autoclavage n’est pas recommandé, car il peut dégrader le tampon.

Conservation : Conserver le tampon à **4 °C** dans un flacon protégé de la lumière (ambré) pour limiter le jaunissement au fil du temps.

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