Herstellung des Puffers MOPS

MOPS-Puffer ist ein zwitterionisches Puffersystem, das aufgrund seiner wirksamen Pufferkapazität nahe dem neutralen pH-Wert und seiner geringen Metallbindung häufig in der Molekularbiologie, insbesondere für RNA-bezogene Anwendungen, eingesetzt wird.

MOPS-Puffer – Zusammensetzung der 1X-Arbeitslösung

Anwendungen von MOPS-Puffer

MOPS-Puffer wird häufig in der Molekularbiologie eingesetzt, insbesondere für die RNA-Elektrophorese (etwa in denaturierenden Agarosegelen), die Handhabung von RNA und enzymatische Reaktionen, die eine stabile Pufferung nahe pH 7.0 erfordern. Seine geringe Wechselwirkung mit Metallionen und niedrige UV-Absorption machen ihn für empfindliche biochemische und Nukleinsäureanwendungen geeignet.

Hinweise zur Herstellung, Sterilisation und Lagerung

• Vor dem Einstellen des pH-Werts diesen erst messen, nachdem alle Komponenten vollständig gelöst sind. Bei Herstellung mit MOPS als freier Säure wird üblicherweise NaOH verwendet, bei Herstellung mit MOPS-Natriumsalz Essigsäure.
• Autoklavieren wird nicht empfohlen, da hohe Temperaturen zu einer Gelbfärbung der Lösung führen können.
• Frisch hergestellte Lösungen sind farblos und klar. Eine mit der Zeit auftretende blassgelbe Färbung beeinträchtigt die Verwendung nicht; bei dunklerer Färbung die Lösung verwerfen.
• Wasserfreies Natriumacetat ist hygroskopisch. Längere Exposition beim Einwiegen vermeiden.
• EDTA (freie Säure) ist äußerst schwer löslich und erfordert alkalische Bedingungen. Die Herstellung einer EDTA-Stammlösung wird empfohlen; EDTA-Lösung oder EDTA·2Na·2H₂O wird bevorzugt.
• Für RNA-Anwendungen während des gesamten Herstellungsprozesses eine DEPC-Behandlung durchführen.
• Sterilisation: Filtration mit 0.22 μm.
• Lagerung: Bei 4°C in einer Braunglasflasche.