Herstellung des Puffers TB
Diese Anleitung beschreibt die Herstellung eines Tris-Borat-Puffers mit einer festgelegten Molarität für den Laborgebrauch.
Tris-Borat-Puffer (TB) ist ein EDTA-freier Elektrophoresepuffer, der sich für die Hochspannungs-DNA-Elektrophorese und die schnelle Trennung kleiner DNA-Fragmente eignet.
Tris-Borat-Puffer (TB) – Zusammensetzung der 1X-Arbeitslösung
| Name | Formel | Konzentration (1X) | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris-Base | C₄H₁₁NO₃ | 89 mM | 77-86-1 |
| Borat | H₃BO₃ | 89 mM | 10043-35-3 |
Anwendungen von Tris-Borat-Puffer (TB)
Tris-Borat-Puffer wird häufig bei der DNA-Analyse mittels Agarosegelelektrophorese verwendet, wenn EDTA unerwünscht ist. Ohne EDTA eignet sich TB-Puffer für Hochspannungselektrophorese und ermöglicht eine deutlich schnellere Trennung (etwa dreimal schneller als herkömmliche Puffer) sowie eine bessere Auflösung, insbesondere bei niedermolekularen DNA-Fragmenten.
Hinweise zur Herstellung, Sterilisation und Lagerung
- Bildet sich eine geringe Menge Niederschlag, kann dieser in einem Wasserbad bei 37°C wieder gelöst werden, ohne die Verwendung zu beeinträchtigen. Bleibt nach dem Wasserbad Niederschlag zurück, ist die Lösung zu verwerfen.
- EDTA-freier TB-Elektrophoresepuffer eignet sich für Hochspannungselektrophorese und ermöglicht schnellere Analysen und eine bessere DNA-Auflösung, insbesondere bei niedermolekularer DNA.
- Sterilisation: meist nicht erforderlich; je nach Bedarf wählen.
- Lagerung: Raumtemperatur.
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