Preparo do tampão TB
Este guia descreve o preparo de um tampão Tris-borato em uma molaridade definida para uso em laboratório.
O tampão Tris-borato (TB) é um tampão de eletroforese sem EDTA, adequado para eletroforese de DNA em alta tensão e separação rápida de fragmentos pequenos de DNA.
Tampão Tris-borato (TB) – Composição da solução de trabalho 1X
| Nome | Fórmula | Concentração (1X) | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris base | C₄H₁₁NO₃ | 89 mM | 77-86-1 |
| Borato | H₃BO₃ | 89 mM | 10043-35-3 |
Aplicações do tampão Tris-borato (TB)
O tampão Tris-borato é comumente usado na eletroforese em gel de agarose para análise de DNA quando o EDTA não é desejado. A ausência de EDTA permite usar o tampão TB em eletroforese de alta tensão, com separação significativamente mais rápida (aproximadamente três vezes mais rápida que com tampões convencionais) e melhor resolução, especialmente para fragmentos de DNA de baixo peso molecular.
Dicas de preparo, esterilização e armazenamento
- Se houver uma pequena quantidade de precipitado, ela pode ser redissolvida colocando a solução em banho-maria a 37°C, sem prejudicar o uso. Se o precipitado persistir após o banho-maria, descarte a solução.
- O tampão de eletroforese TB sem EDTA é adequado para eletroforese em alta tensão, permitindo análises mais rápidas e melhor resolução do DNA, especialmente de baixo peso molecular.
- Esterilização: geralmente desnecessária; escolher conforme a necessidade.
- Armazenamento: temperatura ambiente.
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