Preparo do tampão de lise Co-IP
Este guia descreve o preparo de um tampão de lise para coimunoprecipitação (Co-IP) em uma molaridade definida para uso em laboratório.
O tampão de lise Co‑IP é usado em experimentos de imunoprecipitação para lisar suavemente as células, preservando as interações proteína–proteína.
Tampão de lise Co‑IP – Composição
| Nome | Fórmula | Concentração | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris‑Cl (pH 7.4) | C₄H₁₁NO₃ | 25 mM | 77‑86‑1 |
| Cloreto de sódio | NaCl | 150 mM | 7647‑14‑5 |
| EDTA | C₁₀H₁₆N₂O₈ | 1 mM | 60‑00‑4 |
| NP‑40 | (C₂H₄O)nC₁₄H₂₂O | 1% (v/v) | 26027‑38‑3 |
| Glicerina | C₃H₈O₃ | 5% (v/v) | 56‑81‑5 |
Esterilização e armazenamento
- Esterilização: geralmente não é necessária; a filtração (0.22 μm) é opcional quando se deseja remover partículas ou microrganismos.
- Armazenamento: 4 °C (refrigerado; evitar armazenamento prolongado em temperatura ambiente).
Dicas
- Não misturar diretamente soluções estoque concentradas que possam causar precipitação de sais; primeiro adicionar os componentes do tampão a água suficiente e depois misturar.
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