Preparación del tampón de lisis Co-IP
Esta guía describe la preparación de un tampón de lisis para coinmunoprecipitación (Co-IP) a una molaridad definida para uso en laboratorio.
El tampón de lisis Co‑IP se utiliza en experimentos de inmunoprecipitación para lisar suavemente las células y preservar las interacciones proteína–proteína.
Tampón de lisis Co‑IP – Composición
| Nombre | Fórmula | Concentración | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris‑Cl (pH 7.4) | C₄H₁₁NO₃ | 25 mM | 77‑86‑1 |
| Cloruro de sodio | NaCl | 150 mM | 7647‑14‑5 |
| EDTA | C₁₀H₁₆N₂O₈ | 1 mM | 60‑00‑4 |
| NP‑40 | (C₂H₄O)nC₁₄H₂₂O | 1% (v/v) | 26027‑38‑3 |
| Glicerina | C₃H₈O₃ | 5% (v/v) | 56‑81‑5 |
Esterilización y almacenamiento
- Esterilización: generalmente no es necesaria; la filtración (0.22 μm) es opcional si se desea eliminar partículas o microorganismos.
- Almacenamiento: 4 °C (refrigerado; evitar el almacenamiento prolongado a temperatura ambiente).
Consejos
- No mezclar directamente soluciones madre concentradas que puedan provocar la precipitación de sales; añadir primero los componentes del tampón a suficiente agua y después mezclar.
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