Herstellung des Co-IP-Lysepuffers
Diese Anleitung beschreibt die Herstellung eines Lysepuffers für die Koimmunpräzipitation (Co-IP) mit einer festgelegten Molarität für den Laborgebrauch.
Co‑IP-Lysepuffer wird bei Immunpräzipitationsexperimenten zur schonenden Zelllyse unter Erhalt von Protein–Protein-Interaktionen verwendet.
Co‑IP-Lysepuffer – Zusammensetzung
| Name | Formel | Konzentration | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris‑Cl (pH 7.4) | C₄H₁₁NO₃ | 25 mM | 77‑86‑1 |
| Natriumchlorid | NaCl | 150 mM | 7647‑14‑5 |
| EDTA | C₁₀H₁₆N₂O₈ | 1 mM | 60‑00‑4 |
| NP‑40 | (C₂H₄O)nC₁₄H₂₂O | 1% (v/v) | 26027‑38‑3 |
| Glycerin | C₃H₈O₃ | 5% (v/v) | 56‑81‑5 |
Sterilisation und Lagerung
- Sterilisation: In der Regel nicht erforderlich; eine Filtration (0.22 μm) ist optional, wenn Partikel oder Mikroorganismen entfernt werden sollen.
- Lagerung: 4 °C (gekühlt; längerfristige Lagerung bei Raumtemperatur vermeiden).
Hinweise
- Konzentrierte Stammlösungen, deren Vermischen Salze ausfällen kann, nicht direkt miteinander mischen; die Pufferkomponenten zunächst zu ausreichend Wasser geben und dann mischen.
Vorschau
