Preparación del tampón de lisis NP-40
Esta guía describe la preparación de un tampón de lisis NP-40 a una molaridad definida para uso en laboratorio.
El tampón de lisis NP-40 se utiliza habitualmente para la lisis celular y la extracción de proteínas.
Tampón de lisis NP-40 – Composición
| Nombre | Fórmula | Concentración | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris-Cl (pH 8.0) | C₄H₁₁NO₃ | 50 mM | 77-86-1 |
| Cloruro de sodio | NaCl | 150 mM | 7647-14-5 |
| NP-40 | (C₂H₄O)nC₁₄H₂₂O | 1% (v/v) | 26027-38-3 |
Esterilización y almacenamiento
- Esterilización: filtración de 0.22 μm o autoclave
- Almacenamiento: temperatura ambiente
Consejos
- Se pueden añadir diversos inhibidores de proteasas y fosfatasas según sea necesario. Los tampones que contienen inhibidores deben almacenarse a −20°C.
- Añadir PMSF a una concentración final de 1 mM en los minutos inmediatamente anteriores al uso.
- Triton X-100 también puede utilizarse como sustituto de NP-40.
- Si se realiza autoclavado, añadir NP-40 después de la esterilización.
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