Préparation du tampon de lyse NP-40
Ce guide décrit la préparation d'un tampon de lyse NP-40 à une molarité définie pour une utilisation en laboratoire.
Le tampon de lyse NP-40 est couramment utilisé pour la lyse cellulaire et l’extraction des protéines.
Tampon de lyse NP-40 – Composition
| Nom | Formule | Concentration | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris-Cl (pH 8.0) | C₄H₁₁NO₃ | 50 mM | 77-86-1 |
| Chlorure de sodium | NaCl | 150 mM | 7647-14-5 |
| NP-40 | (C₂H₄O)nC₁₄H₂₂O | 1% (v/v) | 26027-38-3 |
Stérilisation et conservation
- Stérilisation : filtration à 0.22 μm ou autoclavage
- Conservation : température ambiante
Conseils
- Divers inhibiteurs de protéases et de phosphatases peuvent être ajoutés selon les besoins. Les tampons contenant des inhibiteurs doivent être conservés à −20°C.
- Ajouter du PMSF à une concentration finale de 1 mM dans les quelques minutes précédant l’utilisation.
- Le Triton X-100 peut également remplacer le NP-40.
- En cas d’autoclavage, ajouter le NP-40 après stérilisation.
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