Preparo do tampão de lise NP-40
Este guia descreve o preparo de um tampão de lise NP-40 em uma molaridade definida para uso em laboratório.
O tampão de lise NP-40 é comumente usado para lise celular e extração de proteínas.
Tampão de lise NP-40 – Composição
| Nome | Fórmula | Concentração | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris-Cl (pH 8.0) | C₄H₁₁NO₃ | 50 mM | 77-86-1 |
| Cloreto de sódio | NaCl | 150 mM | 7647-14-5 |
| NP-40 | (C₂H₄O)nC₁₄H₂₂O | 1% (v/v) | 26027-38-3 |
Esterilização e armazenamento
- Esterilização: filtração de 0.22 μm ou autoclavagem
- Armazenamento: temperatura ambiente
Dicas
- Diversos inibidores de proteases e fosfatases podem ser adicionados conforme necessário. Tampões contendo inibidores devem ser armazenados a −20°C.
- Adicionar PMSF a uma concentração final de 1 mM nos minutos imediatamente anteriores ao uso.
- O Triton X-100 também pode ser usado como substituto do NP-40.
- Se for realizada autoclavagem, adicionar NP-40 após a esterilização.
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