원액 조제 가이드 - L-글루타민(200 mM)
L-글루타민은 세포배양 배지에서 영양원 및 질소 공급원으로 사용되는 필수 아미노산입니다. 물과 생리식염수에 녹지만 용액 상태에서는 불안정하여 시간이 지나면 암모니아로 분해되고, 이는 세포에 독성을 줄 수 있습니다. 따라서 고농도 원액을 조제해 무균 여과 후 소분하고, 사용 전까지 냉동 보관하는 것이 권장됩니다.
목적
물 또는 0.85% 생리식염수에 200 mM L-글루타민 용액 100 mL를 조제합니다.
구성
- 세포배양용 water 또는 0.85% 생리식염수에 녹인 200 mM L-글루타민(C5H10N2O3) 용액
필요 재료
- L-글루타민 분말(분석용 또는 세포배양 등급)
- 세포배양 등급 water(Milli-Q) 또는 0.85% 생리식염수
- 비커 또는 250 mL 삼각플라스크
- 메스실린더 또는 메스플라스크
- 자기교반기 또는 유리막대
- 멸균 0.22 µm 시린지 필터 및 멸균 용기
- 개인보호구(장갑, 고글, 실험복)
조제 절차
- Step 1
**L-글루타민 2.92 g**을 칭량해 세포배양 등급 water 또는 0.85% 생리식염수 **약 90 mL**가 담긴 250 mL 비커 또는 삼각플라스크에 넣습니다. - Step 2
자기교반기 또는 유리막대로 L-글루타민이 완전히 녹고 용액이 맑아질 때까지 교반합니다. - Step 3
용해된 용액을 메스플라스크 또는 메스실린더로 옮기고, 동일한 용매(water 또는 0.85% 생리식염수)로 최종 부피를 **100 mL**로 맞춥니다. - Step 4
무균성을 확보하기 위해 **0.22 µm** 멤브레인으로 여과해 멸균 용기에 받습니다 (오토클레이브 금지).
Storage: 멸균 용액을 소용량 튜브(예: 5 mL)로 소분해 **−20 °C**에 보관하세요. 냉동 원액은 일반적으로 수개월 안정합니다.
사용 가능한 시약
| 명칭 | 분자식 | MW | CAS |
|---|---|---|---|
| L-글루타민 | C5H10N2O3 | 146.14 | 56‑85‑9 |
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