Preparo de solução estoque de L-glutamina

Guia de preparo de soluções estoque – L‑glutamina (200 mM)

A L‑glutamina é um aminoácido essencial usado como nutriente e fonte de nitrogênio em meios de cultura celular. É solúvel em água e solução salina, mas instável em solução, degradando-se ao longo do tempo em amônia, que pode ser tóxica para as células. Portanto, devem ser preparadas soluções estoque concentradas, esterilizadas por filtração, distribuídas em alíquotas e armazenadas congeladas até o uso.

Objetivo

Preparo de 100 mL de solução de L‑glutamina a 200 mM em água ou solução salina a 0.85%.

Composição

• Solução de L‑glutamina a 200 mM (C₅H₁₀N₂O₃) em água de grau para cultura celular ou solução salina a 0.85%

Materiais necessários

• L‑glutamina em pó (grau analítico ou para cultura celular)
• Água de grau para cultura celular (Milli‑Q) ou solução salina a 0.85%
• Béquer ou Erlenmeyer de 250 mL
• Proveta ou balão volumétrico
• Agitador magnético ou bastão de vidro
• Filtro de seringa estéril de 0.22 µm e recipiente estéril
• Equipamentos de proteção individual (luvas, óculos, jaleco)

Procedimento

• Etapa 1
  Pese **2.92 g de L‑glutamina** e transfira para um béquer ou Erlenmeyer de 250 mL contendo **~90 mL** de água de grau para cultura celular ou solução salina a 0.85%.
• Etapa 2
  Agite a solução com um agitador magnético ou bastão de vidro até dissolver completamente a L‑glutamina e obter uma solução límpida.
• Etapa 3
  Transfira a solução dissolvida para um balão volumétrico ou proveta e ajuste o volume final para **100 mL** com o mesmo solvente utilizado (água ou solução salina a 0.85%).
• Etapa 4
  Esterilize a solução por filtração com uma membrana de **0.22 µm** para um recipiente estéril para garantir a esterilidade (não autoclave).

Armazenamento: Distribua a solução estéril em tubos pequenos (por exemplo, 5 mL) e armazene a **–20 °C**. A solução estoque congelada é estável por vários meses.

Reagentes disponíveis