L-グルタミン ストック溶液の調製

ストック溶液調製ガイド – L-グルタミン（200 mM）

L-グルタミンは細胞培養培地で重要な栄養源・窒素源となるアミノ酸です。 水や生理食塩水に溶けますが、溶液中では時間経過とともに分解してアンモニアを生じ、 細胞に悪影響を与える可能性があります。そのため、高濃度ストックを調製して無菌ろ過し、 小分けして凍結保存する運用が一般的です。

目的

水または 0.85% 生理食塩水中で、200 mM L-グルタミン溶液を 100 mL 調製する。

組成

• 200 mM L-グルタミン（C₅H₁₀N₂O₃）溶液（細胞培養用水または 0.85% 生理食塩水）

必要な試薬・器具

• L-グルタミン粉末（分析用または細胞培養グレード）
• 細胞培養グレード水（Milli-Q）または 0.85% 生理食塩水
• ビーカーまたは 250 mL 三角フラスコ
• メスシリンダーまたはメスフラスコ
• 磁気攪拌機またはガラス棒
• 0.22 µm シリンジフィルターおよび無菌容器
• 個人防護具（手袋・保護眼鏡・白衣）

手順

• Step 1
  L-グルタミンを **2.92 g** 秤量し、細胞培養用水または 0.85% 生理食塩水 **約 90 mL** を入れた 250 mL ビーカー（または三角フラスコ）に加えます。
• Step 2
  磁気攪拌機またはガラス棒で攪拌し、溶液が透明になるまで完全に溶解させます。
• Step 3
  溶解液をメスフラスコ（またはメスシリンダー）に移し、同じ溶媒で **100 mL** まで定容します。
• Step 4
  無菌性を確保するため、**0.22 µm** メンブレンでろ過滅菌します（オートクレーブ不可）。

保存: 無菌溶液を 5 mL などの小容量に分注し、**−20 °C** で保存してください。 凍結ストックは通常数か月安定です。

利用可能な試薬