Preparación de solución madre de L-glutamina

Guía de preparación de soluciones madre – L‑glutamina (200 mM)

La L‑glutamina es un aminoácido esencial utilizado como nutriente y fuente de nitrógeno en medios de cultivo celular. Es soluble en agua y solución salina, pero inestable en solución: con el tiempo se degrada formando amoníaco, que puede ser tóxico para las células. Por ello, deben prepararse soluciones madre concentradas, esterilizarse por filtración, dividirse en alícuotas y conservarse congeladas hasta su uso.

Objetivo

Preparación de 100 mL de solución de L‑glutamina de 200 mM en agua o solución salina al 0.85%.

Composición

• Solución de L‑glutamina de 200 mM (C₅H₁₀N₂O₃) en agua de grado para cultivo celular o solución salina al 0.85%

Materiales necesarios

• L‑glutamina en polvo (grado analítico o para cultivo celular)
• Agua de grado para cultivo celular (Milli‑Q) o solución salina al 0.85%
• Vaso de precipitados o matraz Erlenmeyer de 250 mL
• Probeta o matraz aforado
• Agitador magnético o varilla de vidrio
• Filtro de jeringa estéril de 0.22 µm y recipiente estéril
• Equipo de protección personal (guantes, gafas, bata de laboratorio)

Procedimiento

• Paso 1
  Pese **2.92 g de L‑glutamina** y transfiera a un vaso de precipitados o matraz Erlenmeyer de 250 mL con **~90 mL** de agua de grado para cultivo celular o solución salina al 0.85%.
• Paso 2
  Agite la solución con un agitador magnético o una varilla de vidrio hasta disolver completamente la L‑glutamina y obtener una solución transparente.
• Paso 3
  Transfiera la solución disuelta a un matraz aforado o una probeta y ajuste el volumen final a **100 mL** con el mismo disolvente utilizado (agua o solución salina al 0.85%).
• Paso 4
  Esterilice la solución por filtración con una membrana de **0.22 µm** en un recipiente estéril para garantizar la esterilidad (no autoclave).

Conservación: Divida la solución estéril en tubos pequeños (p. ej., 5 mL) y conserve a **–20 °C**. La solución madre congelada es estable durante varios meses.

Reactivos disponibles