Herstellung einer L-Glutamin-Stammlösung

Anleitung zur Herstellung einer Stammlösung – L‑Glutamin (200 mM)

L‑Glutamin ist eine essenzielle Aminosäure, die als Nährstoff und Stickstoffquelle in Zellkulturmedien verwendet wird. Es ist in Wasser und Kochsalzlösung löslich, jedoch in Lösung instabil und zerfällt mit der Zeit zu Ammoniak, das für Zellen toxisch sein kann. Daher sollten konzentrierte Stammlösungen hergestellt, sterilfiltriert, aliquotiert und bis zur Verwendung gefroren gelagert werden.

Ziel

Herstellung von 100 mL einer 200 mM L‑Glutamin-Lösung in Wasser oder 0.85% Kochsalzlösung.

Zusammensetzung

• 200 mM L‑Glutamin (C₅H₁₀N₂O₃) in Wasser für die Zellkultur oder 0.85% Kochsalzlösung

Benötigte Materialien

• L‑Glutamin-Pulver (Analysen- oder Zellkulturqualität)
• Wasser für die Zellkultur (Milli‑Q) oder 0.85% Kochsalzlösung
• Becherglas oder 250 mL Erlenmeyerkolben
• Messzylinder oder Messkolben
• Magnetrührer oder Glasstab
• Steriler 0.22 µm Spritzenfilter und steriles Gefäß
• Persönliche Schutzausrüstung (Handschuhe, Schutzbrille, Laborkittel)

Vorgehensweise

• Schritt 1
  **2.92 g L‑Glutamin** abwiegen und in ein Becherglas oder einen Erlenmeyerkolben mit 250 mL Fassungsvermögen und **~90 mL** Wasser für die Zellkultur oder 0.85% Kochsalzlösung überführen.
• Schritt 2
  Die Lösung mit einem Magnetrührer oder Glasstab rühren, bis das L‑Glutamin vollständig gelöst und die Lösung klar ist.
• Schritt 3
  Die gelöste Lösung in einen Messkolben oder Messzylinder überführen und das Endvolumen mit demselben verwendeten Lösungsmittel (Wasser oder 0.85% Kochsalzlösung) auf **100 mL** einstellen.
• Schritt 4
  Die Lösung durch eine **0.22 µm** Membran in ein steriles Gefäß sterilfiltrieren, um Sterilität sicherzustellen (nicht autoklavieren).

Lagerung: Die sterile Lösung in kleine Röhrchen aliquotieren (z. B. 5 mL) und bei **–20 °C** lagern. Die gefrorene Stammlösung ist mehrere Monate stabil.

Verfügbare Reagenzien