Solution I는 플라스미드 분리 과정에서 알칼리 용해 전에 세균 세포를 재현탁하고 플라스미드 DNA를 보호하는 데 사용됩니다.
Solution I (Plasmid Isolation) - 조성
| 성분명 | 화학식 | 농도 | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris-Cl (pH 8.0) | C₄H₁₁NO₃ | 25 mM | 77-86-1 |
| EDTA | C₁₀H₁₆N₂O₈ | 10 mM | 60-00-4 |
| 포도당(선택) | C₆H₁₂O₆ | 50 mM | 50-99-7 |
| RNase A(사용 전 첨가) | N/A | 0.01% (w/v) | 9001-99-4 |
Solution I의 역할
Solution I는 회수한 세균 세포를 재현탁하는 용액입니다. Tris-Cl은 pH를 안정화하고, EDTA는 2가 양이온을 킬레이션해 DNase를 억제하며, 포도당은 삼투압을 유지하고, RNase A는 RNA 오염을 제거합니다.
조제 팁, 멸균 및 보관
- Solution I에서 포도당은 선택 성분이지만, 리소자임을 넣는 경우에는 반드시 포함해야 합니다.
- 포도당이 포함된 버퍼는 미생물 증식 위험이 있으므로 적절히 보관하고 사용 전 상태를 확인하세요.
- RNase A는 용액 상태에서 활성이 점차 감소하므로, RNase A 포함 버퍼는 4°C 보관하고 1개월 이내 사용하세요.
- RNase A는 사용 직전에 별도로 첨가해 최종 100 μg/mL가 되도록 할 수 있습니다.
- 멸균: 포도당을 넣지 않은 경우 오토클레이브 가능하며, 포도당을 포함하는 경우 Tris-Cl, EDTA, 포도당을 각각 멸균한 뒤 혼합하세요.
- 보관: 4°C.
- 시판 Solution I 조성 다수는 포도당을 포함하지 않으며, 일반적으로 50 mM Tris-Cl을 사용합니다.
Preview
