SDS-PAGE 로딩 버퍼 (샘플 버퍼)는 변성 폴리아크릴아마이드 겔 전기영동용 단백질 시료를 준비할 때 사용되며, 단백질 변성, 시료 밀도 부여, 추적 염료 기능을 제공합니다.
SDS-PAGE 로딩 버퍼 - 1X 작업용 조성
| 성분명 | 화학식 | 농도 (1X) | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris-Cl (pH 6.8) | C₄H₁₁NO₃ | 50 mM | 77-86-1 |
| SDS | C₁₂H₂₅O₄NaS | 2% (w/v) | 151-21-3 |
| 브로모페놀 블루 | C₁₉H₁₀Br₄O₅S | 0.1% (w/v) | 115-39-9 |
| 글리세린 | C₃H₈O₃ | 10% (v/v) | 56-81-5 |
| β-머캅토에탄올(사용 전 첨가) | C₂H₆OS | 1% (v/v) | 60-24-2 |
SDS-PAGE 로딩 버퍼의 활용
SDS-PAGE 로딩은 단백질을 변성시키고, 균일한 음전하를 부여하고, 시료 밀도를 높여 로딩을 용이하게 하며, 변성 폴리아크릴아미드 겔 전기영동 중 전기영동 진행 상황을 시각적으로 모니터링할 수 있도록 합니다 .
조제 팁, 멸균 및 보관
- 환원제는 조제 시 미리 넣어 −20°C 보관할 수 있으나, 시간 경과에 따른 활성 저하로 고스트 밴드가 생길 수 있습니다.
- 환원 조건 SDS-PAGE에서는 사용 직전 β-메르캅토에탄올 을 최종 1% (v/v)로 첨가하는 것을 권장하며, 첨가 후 버퍼는 보통 약 1개월 안정합니다.
- β-mercaptoethanol은 독성이 있고 냄새가 강하므로 적절한 보호구를 착용하세요.
- 대체 조성으로 1% (v/v) β-메르캅토에탄올 대신 100 mM DTT를 사용할 수 있습니다.
- SDS는 저온에서 응집성 침전이 생길 수 있으므로 사용 전 완전히 용해되었는지 확인하세요.
- 멸균: 일반적으로 필요하지 않으며, 필요에 따라 선택하세요.
- 보관: 실온 보관하되, 환원제를 미리 첨가한 경우에는 소분하여 −20°C 보관하세요.
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