SDS-PAGE 로딩 버퍼 조제

이 가이드는 실험실에서 사용하는 지정 몰농도의 버퍼 조제 방법을 설명합니다.

SDS-PAGE 로딩 버퍼 (샘플 버퍼)는 변성 폴리아크릴아마이드 겔 전기영동용 단백질 시료를 준비할 때 사용되며, 단백질 변성, 시료 밀도 부여, 추적 염료 기능을 제공합니다.

SDS-PAGE 로딩 버퍼 - 1X 작업용 조성

성분명화학식농도 (1X)CAS
Tris-Cl (pH 6.8)C₄H₁₁NO₃50 mM77-86-1
SDSC₁₂H₂₅O₄NaS2% (w/v)151-21-3
브로모페놀 블루C₁₉H₁₀Br₄O₅S0.1% (w/v)115-39-9
글리세린C₃H₈O₃10% (v/v)56-81-5
β-머캅토에탄올(사용 전 첨가)C₂H₆OS1% (v/v)60-24-2

SDS-PAGE 로딩 버퍼의 활용

SDS-PAGE 로딩은 단백질을 변성시키고, 균일한 음전하를 부여하고, 시료 밀도를 높여 로딩을 용이하게 하며, 변성 폴리아크릴아미드 겔 전기영동 중 전기영동 진행 상황을 시각적으로 모니터링할 수 있도록 합니다 .

조제 팁, 멸균 및 보관

  • 환원제는 조제 시 미리 넣어 −20°C 보관할 수 있으나, 시간 경과에 따른 활성 저하로 고스트 밴드가 생길 수 있습니다.
  • 환원 조건 SDS-PAGE에서는 사용 직전 β-메르캅토에탄올 을 최종 1% (v/v)로 첨가하는 것을 권장하며, 첨가 후 버퍼는 보통 약 1개월 안정합니다.
  • β-mercaptoethanol은 독성이 있고 냄새가 강하므로 적절한 보호구를 착용하세요.
  • 대체 조성으로 1% (v/v) β-메르캅토에탄올 대신 100 mM DTT를 사용할 수 있습니다.
  • SDS는 저온에서 응집성 침전이 생길 수 있으므로 사용 전 완전히 용해되었는지 확인하세요.
  • 멸균: 일반적으로 필요하지 않으며, 필요에 따라 선택하세요.
  • 보관: 실온 보관하되, 환원제를 미리 첨가한 경우에는 소분하여 −20°C 보관하세요.
Preview
BioCalculator-Preview