원액 조제 가이드 - DTT (Dithiothreitol)
Dithiothreitol(DTT, Cleland 시약)은 단백질 생화학에서 널리 사용되는 환원제입니다. 이황화 결합(–S–S–)을 환원하고, 효소를 안정화하며, 단백질의 기능성 티올기를 보호합니다. 수용액 원액은 산화되기 쉬우므로 가능한 한 신선하게 조제하는 것이 좋습니다.
화학 정보
| 명칭 | 분자식 | 분자량 | CAS |
|---|---|---|---|
| DTT (DL-Dithiothreitol) | C₄H₁₀O₂S₂ | 154.25 g/mol | 3483-12-3 |
응용 분야
- 단백질 이황화 결합 환원
- 효소 안정화
- SDS-PAGE 및 Western blot 시료 준비
용해도 및 취급
- DTT는 물에 잘 녹는 백색 결정성 고체로, 투명한 용액을 형성합니다.
- 원액은 nuclease-free water로 조제하세요. 공기 중 산화로 활성이 점차 감소할 수 있습니다.
- 가열 시 환원제가 분해되므로 DTT 용액의 오토클레이브는 피하세요.
원액 조제 방법
1 M DTT 원액 조제를 위해 분자량으로 필요한 질량을 계산합니다:
필요 질량(g) = 분자량 × 부피(L) × 농도(mol/L)
10 mL 1 M 용액의 경우: 154.25 × 0.010 × 1 = 1.54 g
10 mL 1 M 용액의 경우: 154.25 × 0.010 × 1 = 1.54 g
- DTT 분말 1.54 g을 칭량합니다.
- 깨끗한 튜브에 옮기고 nuclease-free water 약 8-9 mL를 넣습니다.
- 완전히 용해될 때까지 혼합합니다.
- nuclease-free water로 부피를 10 mL로 맞춥니다.
- 필요 시 0.22 µm 필터로 멸균합니다.
- 1회 사용량으로 소분하여 −20 °C에 보관합니다.
보관 및 안정성
- 고체 DTT는 건조 상태로 2-8 °C에 보관하면 장기 안정성을 유지할 수 있습니다.
- 원액은 산화 최소화를 위해 소분 후 −20 °C 보관을 권장합니다.
- 수용성 DTT는 산화되기 쉬우므로 중요한 실험에는 작업용 용액을 신선하게 준비하세요.
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