디티오트레이톨 (DTT) 원액 조제 가이드

이 가이드는 실험실에서 사용하는 지정 몰농도의 디티오트레이톨 (DTT) 원액 조제 방법을 설명합니다.

원액 조제 가이드 - DTT (Dithiothreitol)

Dithiothreitol(DTT, Cleland 시약)은 단백질 생화학에서 널리 사용되는 환원제입니다. 이황화 결합(–S–S–)을 환원하고, 효소를 안정화하며, 단백질의 기능성 티올기를 보호합니다. 수용액 원액은 산화되기 쉬우므로 가능한 한 신선하게 조제하는 것이 좋습니다.

화학 정보

명칭분자식분자량CAS
DTT (DL-Dithiothreitol)C₄H₁₀O₂S₂154.25 g/mol3483-12-3

응용 분야

  • 단백질 이황화 결합 환원
  • 효소 안정화
  • SDS-PAGE 및 Western blot 시료 준비

용해도 및 취급

  • DTT는 물에 잘 녹는 백색 결정성 고체로, 투명한 용액을 형성합니다.
  • 원액은 nuclease-free water로 조제하세요. 공기 중 산화로 활성이 점차 감소할 수 있습니다.
  • 가열 시 환원제가 분해되므로 DTT 용액의 오토클레이브는 피하세요.

원액 조제 방법

1 M DTT 원액 조제를 위해 분자량으로 필요한 질량을 계산합니다:

필요 질량(g) = 분자량 × 부피(L) × 농도(mol/L)
10 mL 1 M 용액의 경우: 154.25 × 0.010 × 1 = 1.54 g
  1. DTT 분말 1.54 g을 칭량합니다.
  2. 깨끗한 튜브에 옮기고 nuclease-free water 약 8-9 mL를 넣습니다.
  3. 완전히 용해될 때까지 혼합합니다.
  4. nuclease-free water로 부피를 10 mL로 맞춥니다.
  5. 필요 시 0.22 µm 필터로 멸균합니다.
  6. 1회 사용량으로 소분하여 −20 °C에 보관합니다.

보관 및 안정성

  • 고체 DTT는 건조 상태로 2-8 °C에 보관하면 장기 안정성을 유지할 수 있습니다.
  • 원액은 산화 최소화를 위해 소분 후 −20 °C 보관을 권장합니다.
  • 수용성 DTT는 산화되기 쉬우므로 중요한 실험에는 작업용 용액을 신선하게 준비하세요.
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