Préparation du tampon PBS
Ce guide décrit la préparation d'une solution saline tamponnée au phosphate à une molarité définie pour une utilisation en laboratoire.
La solution saline tamponnée au phosphate (PBS) est un tampon biologique largement utilisé dans les laboratoires de recherche, isotonique et compatible avec la plupart des cellules, dont le pH est proche des conditions physiologiques.
Solution saline tamponnée au phosphate (PBS) – Composition de la solution de travail 1X
| Nom | Formule | Concentration (1X) | CAS |
|---|---|---|---|
| Chlorure de sodium | NaCl | 137 mM | 7647‑14‑5 |
| Chlorure de potassium | KCl | 2.7 mM | 7447‑40‑7 |
| Phosphate monopotassique | KH₂PO₄ | 1.8 mM | 7778‑77‑0 |
| Phosphate disodique | Na₂HPO₄ | 10 mM | 7558‑79‑4 |
| Chlorure de magnésium (facultatif) | MgCl₂ | 0.5 mM | 7786-30-3 |
| Chlorure de calcium (facultatif) | CaCl₂ | 1 mM | 10043‑52‑4 |
Utilisations courantes du PBS
Le PBS est largement utilisé en biologie moléculaire et en culture cellulaire car il est isotonique et non toxique pour la plupart des cellules. Ses applications comprennent le lavage des cellules ou des tissus, la dilution des échantillons biologiques, la préparation des réactifs, le rinçage des récipients, les immunodosages et les procédures de biologie moléculaire. Le PBS sert également à maintenir l’équilibre osmotique dans les expériences.
Conseils de préparation, stérilisation et conservation
- Le pH de la solution de PBS 10X est de 6.8. Après dilution à 1X, le pH devient 7.4.
- Après préparation avec de l’eau Milli-Q, le PBS 1X atteint généralement un pH de 7.2–7.4 sans ajustement.
- Si un contrôle strict du pH est nécessaire, mesurer et ajuster le pH après dilution.
- La conservation du PBS concentré à 4°C peut entraîner la précipitation de sels. Bien agiter avant utilisation ; jeter si les particules persistent.
- Le phosphate disodique est très hygroscopique ; éviter une exposition prolongée pendant la pesée.
- Le chlorure de calcium et le chlorure de magnésium sont facultatifs ; les ajouter selon les besoins de l’expérience.
- Le CaCl₂ et le MgCl₂ anhydres produisent de la chaleur lors de leur dissolution ; manipuler avec précaution.
- Stérilisation : filtration à 0.22 μm ou autoclavage.
- Conservation : température ambiante ou 4°C.
