Preparación del tampón PBS
Esta guía describe la preparación de una solución salina tamponada con fosfato a una molaridad definida para uso en laboratorio.
La solución salina tamponada con fosfato (PBS) es un tampón biológico ampliamente utilizado en laboratorios de investigación, isotónico y compatible con la mayoría de las células, con un pH cercano a las condiciones fisiológicas.
Solución salina tamponada con fosfato (PBS) – Composición de la solución de trabajo 1X
| Nombre | Fórmula | Concentración (1X) | CAS |
|---|---|---|---|
| Cloruro de sodio | NaCl | 137 mM | 7647‑14‑5 |
| Cloruro de potasio | KCl | 2.7 mM | 7447‑40‑7 |
| Fosfato monopotásico | KH₂PO₄ | 1.8 mM | 7778‑77‑0 |
| Fosfato disódico | Na₂HPO₄ | 10 mM | 7558‑79‑4 |
| Cloruro de magnesio (opcional) | MgCl₂ | 0.5 mM | 7786-30-3 |
| Cloruro de calcio (opcional) | CaCl₂ | 1 mM | 10043‑52‑4 |
Usos habituales del PBS
El PBS se utiliza ampliamente en biología molecular y cultivo celular porque es isotónico y no tóxico para la mayoría de las células. Sus aplicaciones incluyen el lavado de células o tejidos, la dilución de muestras biológicas, la preparación de reactivos, el enjuague de recipientes, los inmunoensayos y los procedimientos de biología molecular. El PBS también se utiliza para mantener el equilibrio osmótico en los experimentos.
Consejos de preparación, esterilización y almacenamiento
- El pH de la solución de PBS 10X es de 6.8. Al diluirla a 1X, el pH pasa a 7.4.
- Después de prepararlo con agua Milli-Q, el PBS 1X suele alcanzar un pH de 7.2–7.4 sin ajuste.
- Si se requiere un control estricto del pH, medirlo y ajustarlo después de la dilución.
- Almacenar PBS concentrado a 4°C puede causar precipitación de sales. Agitar bien antes de usar; desechar si persisten las partículas.
- El fosfato disódico es muy higroscópico; evitar la exposición prolongada durante el pesaje.
- El cloruro de calcio y el cloruro de magnesio son opcionales; añadir según las necesidades experimentales.
- El CaCl₂ y el MgCl₂ anhidros generan calor al disolverse; manipular con cuidado.
- Esterilización: filtración de 0.22 μm o autoclavado.
- Almacenamiento: temperatura ambiente o 4°C.
