Herstellung des Puffers PBS

Phosphatgepufferte Salzlösung (PBS) ist ein in Forschungslaboren häufig verwendeter biologischer Puffer, der isotonisch und mit den meisten Zellen verträglich ist und dessen pH-Wert nahe den physiologischen Bedingungen liegt.

Phosphatgepufferte Salzlösung (PBS) – Zusammensetzung der 1X-Arbeitslösung

Name	Formel	Konzentration (1X)	CAS
Natriumchlorid	NaCl	137 mM	7647‑14‑5
Kaliumchlorid	KCl	2.7 mM	7447‑40‑7
Kaliumdihydrogenphosphat	KH₂PO₄	1.8 mM	7778‑77‑0
Dinatriumhydrogenphosphat	Na₂HPO₄	10 mM	7558‑79‑4
Magnesiumchlorid (optional)	MgCl₂	0.5 mM	7786-30-3
Calciumchlorid (optional)	CaCl₂	1 mM	10043‑52‑4

Häufige Anwendungen von PBS

PBS wird häufig in der Molekularbiologie und Zellkultur eingesetzt, da es isotonisch und für die meisten Zellen nicht toxisch ist. Zu den Anwendungen gehören das Waschen von Zellen oder Geweben, das Verdünnen biologischer Proben, die Reagenzienherstellung, das Spülen von Gefäßen, Immunassays und molekularbiologische Arbeitsabläufe. PBS wird außerdem verwendet, um das osmotische Gleichgewicht in Experimenten aufrechtzuerhalten.

Hinweise zur Herstellung, Sterilisation und Lagerung

Der pH-Wert der 10X-PBS-Lösung beträgt 6.8. Nach Verdünnung auf 1X beträgt der pH-Wert 7.4.
Nach Herstellung mit Milli-Q-Wasser erreicht 1X PBS gewöhnlich ohne Einstellung einen pH-Wert von 7.2–7.4.
Falls eine strenge pH-Kontrolle erforderlich ist, den pH-Wert nach der Verdünnung messen und einstellen.
Die Lagerung von konzentriertem PBS bei 4°C kann zur Ausfällung von Salzen führen. Vor Gebrauch gut schütteln; verwerfen, wenn Partikel bestehen bleiben.
Dinatriumhydrogenphosphat ist stark hygroskopisch; längere Exposition beim Einwiegen vermeiden.
Calciumchlorid und Magnesiumchlorid sind optional; je nach experimentellem Bedarf zugeben.
Wasserfreies CaCl₂ und MgCl₂ erzeugen beim Auflösen Wärme; vorsichtig handhaben.
Sterilisation: Filtration mit 0.22 μm oder Autoklavieren.
Lagerung: Raumtemperatur oder 4°C.