Herstellung des Puffers DPBS

Dulbeccos phosphatgepufferte Salzlösung (DPBS) ist eine modifizierte phosphatgepufferte Salzlösung, die häufig in der Zellkultur und biologischen Forschung verwendet wird und deren pH-Wert und Osmolarität für Säugetierzellen optimiert sind.

Dulbeccos phosphatgepufferte Salzlösung (DPBS) – Zusammensetzung der 1X-Arbeitslösung

Name	Formel	Konzentration (1X)	CAS
Natriumchlorid	NaCl	137 mM	7647-14-5
Kaliumchlorid	KCl	2.7 mM	7447-40-7
Kaliumdihydrogenphosphat	KH₂PO₄	1.47 mM	7778-77-0
Dinatriumhydrogenphosphat	Na₂HPO₄	8.1 mM	7558-79-4
Magnesiumchlorid (optional)	MgCl₂	0.5 mM	7786-30-3
Calciumchlorid (optional)	CaCl₂	1 mM	10043-52-4

Anwendungen von DPBS

DPBS wird in Zellkulturabläufen häufig zum Waschen von Zellen und Geweben, zum Verdünnen von Proben, zum Transport von Zellen und zur Herstellung von Reagenzien verwendet. Im Vergleich zu Standard-PBS ist DPBS besser auf die Bedürfnisse von Säugetierzellen abgestimmt und wird häufig bei Zelldissoziation, Färbung und Mikroskopie eingesetzt.

Hinweise zur Herstellung, Sterilisation und Lagerung

In der Praxis liegt der pH-Wert von mit Milli-Q-Wasser hergestelltem 1X DPBS typischerweise zwischen 7.2 und 7.4; eine Einstellung ist gewöhnlich nicht erforderlich.
Falls eine strenge pH-Kontrolle erforderlich ist, den pH-Wert nach Verdünnung auf 1X messen und einstellen.
Die Lagerung von konzentriertem DPBS bei 4°C kann zur Ausfällung von Salzen führen. Vor Gebrauch gut schütteln; verwerfen, wenn Partikel zurückbleiben.
Wasserfreies Dinatriumhydrogenphosphat ist stark hygroskopisch; längere Exposition beim Einwiegen vermeiden.
Die Zugabe von Calciumchlorid und Magnesiumchlorid sollte sich nach den Anforderungen des Experiments richten.
Wasserfreies CaCl₂ und MgCl₂ setzen beim Auflösen Wärme frei; vorsichtig handhaben.
Sterilisation: Filtration mit 0.22 μm oder Autoklavieren.
Lagerung: Raumtemperatur oder 4 °C.