Dulbecco’s PBS の調製

本ガイドでは、実験室で使用する所定モル濃度のバッファーの調製方法を説明します。

Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline(DPBS)は、細胞培養や生物学研究で広く使われる改良型PBSで、 哺乳類細胞に適したpHと浸透圧に調整されています。

Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline(DPBS)— 1X作業溶液の組成

名称化学式濃度(1X)CAS
塩化ナトリウムNaCl137 mM7647-14-5
塩化カリウムKCl2.7 mM7447-40-7
リン酸二水素カリウムKH₂PO₄1.47 mM7778-77-0
リン酸二ナトリウムNa₂HPO₄8.1 mM7778-77-0
塩化マグネシウム(任意)MgCl₂0.5 mM7791-18-6
塩化カルシウム(任意)CaCl₂1 mM10043-52-4

DPBSの用途

DPBSは細胞や組織の洗浄、サンプルの希釈、細胞の搬送、細胞培養で使用する試薬の調製に 一般的に利用されます。標準PBSに比べて哺乳類細胞に適した処方で、細胞解離、染色、 顕微鏡観察の手順でよく使われます。

調製のポイント、滅菌、保存

  • Milli-Q水で調製した1X DPBSのpHは通常7.2~7.4で、調整は不要なことが多いです。
  • 厳密なpH管理が必要な場合は、1Xに希釈後にpHを測定して調整してください。
  • 濃縮DPBSを4°Cで保存すると塩の析出が起こることがあります。使用前によく振り、 粒子が残る場合は破棄してください。
  • 無水リン酸二ナトリウムは吸湿性が高いため、秤量時の長時間露出を避けてください。
  • 塩化カルシウムと塩化マグネシウムの添加は、実験要件に応じて判断してください。
  • 無水CaCl₂とMgCl₂は溶解時に発熱するため、取り扱いに注意してください。
  • 滅菌:0.22 μmフィルターろ過またはオートクレーブ。
  • 保存:室温または4°C。
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