Préparation du tampon HBS
Ce guide décrit la préparation d'une solution saline tamponnée au HEPES (HBS) à une molarité définie pour une utilisation en laboratoire.
La solution saline tamponnée à l’HEPES (HBS) est couramment utilisée dans les expériences de transfection et les applications de culture cellulaire.
Solution saline tamponnée à l’HEPES (HBS) – Composition
| Nom | Formule | Concentration | CAS |
|---|---|---|---|
| Chlorure de sodium | NaCl | 135 mM | 7647-14-5 |
| Chlorure de potassium | KCl | 5 mM | 7447-40-7 |
| Phosphate disodique | Na₂HPO₄ | 750 µM | 7558-79-4 |
| Glucose | C₆H₁₂O₆ | 5 mM | 50-99-7 |
| HEPES | C₈H₁₈N₂O₄S | 20 mM | 7365-45-9 |
Stérilisation et conservation
- Stérilisation : filtration à 0.22 μm.
- Conservation : répartir en aliquotes et conserver à −20 °C.
Conseils
- Avant utilisation dans des expériences de transfection, tester la préparation en mélangeant 0.5 mL de tampon avec 0.5 mL de CaCl₂ à 250 mM et en agitant au vortex. Un fin précipité doit se former et être visible au microscope. Si aucun précipité ne se forme, ne pas utiliser ce lot pour la transfection.
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