Preparo do tampão HBS
Este guia descreve o preparo de uma solução salina tamponada com HEPES (HBS) em uma molaridade definida para uso em laboratório.
A solução salina tamponada com HEPES (HBS) é comumente usada em experimentos de transfecção e aplicações de cultura celular.
Solução salina tamponada com HEPES (HBS) – Composição
| Nome | Fórmula | Concentração | CAS |
|---|---|---|---|
| Cloreto de sódio | NaCl | 135 mM | 7647-14-5 |
| Cloreto de potássio | KCl | 5 mM | 7447-40-7 |
| Fosfato dissódico | Na₂HPO₄ | 750 µM | 7558-79-4 |
| Glicose | C₆H₁₂O₆ | 5 mM | 50-99-7 |
| HEPES | C₈H₁₈N₂O₄S | 20 mM | 7365-45-9 |
Esterilização e armazenamento
- Esterilização: filtração de 0.22 μm.
- Armazenamento: dividir em alíquotas e armazenar a −20 °C.
Dicas
- Antes do uso em experimentos de transfecção, testar a preparação misturando 0.5 mL do tampão com 0.5 mL de CaCl₂ a 250 mM e agitando em vórtex. Deve se formar um precipitado fino, visível ao microscópio. Se não houver precipitado, não usar este lote para transfecção.
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