Preparo do estabilizador de fosfatase alcalina
Este guia descreve o preparo de um estabilizador de fosfatase alcalina em uma molaridade definida para uso em laboratório.
O estabilizador de fosfatase alcalina é usado para manter a atividade enzimática durante o armazenamento e o manuseio.
Estabilizador de fosfatase alcalina – Composição
| Nome | Fórmula | Concentração | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris-Cl (pH 9.5) | C₄H₁₁NO₃ | 100 mM | 77-86-1 |
| Cloreto de magnésio | MgCl₂ | 5 mM | 7791-18-6 |
| Cloreto de sódio | NaCl | 100 mM | 7647-14-5 |
| Tween-20 | C₅₈H₁₁₄O₂₆ | 0.1% (v/v) | 9005-64-5 |
Esterilização e armazenamento
- Esterilização: filtração de 0.22 μm ou autoclavagem.
- Armazenamento: temperatura ambiente ou 4 °C.
Dicas
- A faixa de concentração de Tween-20 é de 0.1–1% (v/v). Concentrações mais altas ajudam a reduzir a formação de precipitados.
- Se preparado com soluções estoque e água estéreis, não é necessária esterilização adicional.
- Ao preparar diretamente a partir de cloreto de magnésio anidro, considerar a reação exotérmica; adicionar em pequenas porções a uma parte do volume de solvente.
- O uso de soluções estoque estéreis e água ultrapura elimina a necessidade de esterilização adicional.
Prévia
