Préparation du stabilisateur de phosphatase alcaline
Ce guide décrit la préparation d'un stabilisant de phosphatase alcaline à une molarité définie pour une utilisation en laboratoire.
Le stabilisant de la phosphatase alcaline sert à maintenir l’activité enzymatique pendant la conservation et la manipulation.
Stabilisant de la phosphatase alcaline – Composition
| Nom | Formule | Concentration | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris-Cl (pH 9.5) | C₄H₁₁NO₃ | 100 mM | 77-86-1 |
| Chlorure de magnésium | MgCl₂ | 5 mM | 7791-18-6 |
| Chlorure de sodium | NaCl | 100 mM | 7647-14-5 |
| Tween-20 | C₅₈H₁₁₄O₂₆ | 0.1% (v/v) | 9005-64-5 |
Stérilisation et conservation
- Stérilisation : filtration à 0.22 μm ou autoclavage.
- Conservation : température ambiante ou 4 °C.
Conseils
- La concentration de Tween-20 varie de 0.1–1% (v/v). Des concentrations plus élevées aident à réduire la formation de précipités.
- Si la préparation utilise des solutions mères et de l’eau stériles, aucune stérilisation supplémentaire n’est nécessaire.
- Lors d’une préparation directement à partir de chlorure de magnésium anhydre, tenir compte de la réaction exothermique ; l’ajouter par petites portions à une partie du volume de solvant.
- L’utilisation de solutions mères stériles et d’eau ultrapure élimine la nécessité d’une stérilisation supplémentaire.
Aperçu
