Herstellung von Lösung II für die Plasmidisolierung
Diese Anleitung beschreibt die Herstellung von Lösung II (Plasmidisolierung) mit einer festgelegten Molarität für den Laborgebrauch.
Lösung II ist der alkalische Lysepuffer zur Lyse von Bakterienzellen bei der Plasmidisolierung.
Lösung II (Plasmidisolierung) – Zusammensetzung
| Name | Formel | Konzentration | CAS |
|---|---|---|---|
| Natriumhydroxid | NaOH | 0.2 N | 1310-73-2 |
| SDS | C₁₂H₂₅O₄NaS | 1% (w/v) | 151-21-3 |
Funktion von Lösung II
Lösung II lysiert Bakterienzellen durch alkalische Denaturierung chromosomaler DNA und von Proteinen, während die Plasmid-DNA intakt bleibt. SDS unterstützt die Solubilisierung von Membranlipiden und Proteinen.
Hinweise zur Herstellung, Sterilisation und Lagerung
- Die Lagerungsdauer dieser Lösung sollte möglichst einen Monat nicht überschreiten.
- SDS schäumt leicht. Wasser langsam an der Gefäßwand entlang zugeben, um die Schaumbildung zu begrenzen, und starkes Rühren vermeiden.
- SDS kann bei niedrigen Temperaturen flockige Niederschläge bilden; vor Gebrauch vollständig auflösen.
- Sterilisation: meist nicht erforderlich; je nach Bedarf wählen.
- Lagerung: Raumtemperatur.
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