Herstellung von Lösung III für die Plasmidisolierung
Diese Anleitung beschreibt die Herstellung von Lösung III (Plasmidisolierung) mit einer festgelegten Molarität für den Laborgebrauch.
Lösung III ist der Neutralisationspuffer zur Plasmidisolierung.
Lösung III (Plasmidisolierung) – Zusammensetzung
| Name | Formel | Konzentration | CAS |
|---|---|---|---|
| Kaliumacetat | C₂H₃O₂K | 3 M | 127-08-2 |
| Essigsäure | CH₃COOH | 2 M | 64-19-7 |
Funktion von Lösung III
Lösung III neutralisiert das alkalische Lysegemisch aus Lösung II und fällt chromosomale DNA, Proteine und Zelltrümmer aus, während die Plasmid-DNA in Lösung bleibt.
Hinweise zur Herstellung, Sterilisation und Lagerung
- Bei 3 M Kaliumacetat und 2 M Essigsäure beträgt die Gesamtacetatkonzentration der Lösung 5 M. Viele Quellen bezeichnen dies lediglich als 5 M Acetat, was missverständlich sein kann.
- Sterilisation: Autoklavieren.
- Lagerung: 4°C.
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