Préparation de la solution II pour l'isolement de plasmides
Ce guide décrit la préparation de la solution II (isolement de plasmides) à une molarité définie pour une utilisation en laboratoire.
La solution II est le tampon de lyse alcaline utilisé pour lyser les cellules bactériennes lors de l'isolement des plasmides.
Solution II (isolement des plasmides) – Composition
| Nom | Formule | Concentration | CAS |
|---|---|---|---|
| Hydroxyde de sodium | NaOH | 0.2 N | 1310-73-2 |
| SDS | C₁₂H₂₅O₄NaS | 1% (w/v) | 151-21-3 |
Rôle de la solution II
La solution II sert à lyser les cellules bactériennes par dénaturation alcaline de l'ADN chromosomique et des protéines, tout en préservant l'intégrité de l'ADN plasmidique. Le SDS facilite la solubilisation des lipides et des protéines membranaires.
Conseils de préparation, stérilisation et conservation
- La durée de conservation de cette solution ne devrait de préférence pas dépasser un mois.
- Le SDS mousse facilement. Lors de l'ajout d'eau, la faire couler lentement le long de la paroi du récipient pour limiter la mousse et éviter toute agitation vigoureuse.
- Le SDS peut former des précipités floconneux à basse température ; vérifier sa dissolution complète avant utilisation.
- Stérilisation : généralement non nécessaire ; à choisir selon les besoins.
- Conservation : température ambiante.
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