Préparation d'une solution mère de biotine (dans PBS)

Guide de préparation des solutions mères – Biotine dans le PBS

La biotine (vitamine B7) est une vitamine hydrosoluble qui n’est que légèrement soluble dans l’eau neutre, mais se dissout plus facilement dans les solutions chaudes ou alcalines. Une solution mère de biotine à 1 mM peut être préparée dans une solution saline tamponnée au phosphate (PBS) pour les dosages biochimiques et les suppléments de culture cellulaire.

Objectif

Préparation de 10 mL de solution mère de biotine à 1 mM dans le PBS.

Composition

• Biotine à 1 mM (C₁₀H₁₆N₂O₃S) dans le PBS

Matériel nécessaire

• Biotine (masse molaire 244.31 g/mol)
• Solution saline tamponnée au phosphate (PBS)
• NaOH à 1 N (facultatif, pour faciliter la dissolution)
• Eau déionisée / distillée
• Tube gradué de 15 mL à bouchon vissé
• Agitateur vortex ou rotateur de tubes
• Filtre pour seringue (0.22 µm) pour la stérilisation
• Équipement de protection individuelle (gants, lunettes, blouse)

Procédure

• Étape 1
  Peser **2.44 mg** de biotine (pour 10 mL de solution mère à 1 mM). Transférer le solide dans un tube gradué de 15 mL.
• Étape 2
  Ajouter **9 mL de PBS** et mélanger (au vortex ou par rotation) pour dissoudre. Au besoin, ajouter quelques gouttes de NaOH à 1 N pour faciliter la dissolution de la biotine ; ne pas dissoudre dans de l’eau pure seule.
• Étape 3
  Ajuster le volume de la solution à **10 mL** avec de l’eau déionisée. Mélanger à nouveau.
• Étape 4
  Stériliser par filtration sur un **filtre pour seringue de 0.22 µm** dans un récipient stérile, en conditions aseptiques.

Conservation : Répartir aseptiquement en petites aliquotes (p. ex., 0.5 mL ou 1 mL). Conserver à **–20 °C** jusqu’à utilisation pour maintenir la stabilité.

Réactifs disponibles