Preparación de solución madre de biotina (en PBS)

Guía de preparación de soluciones madre – Biotina en PBS

La biotina (vitamina B7) es una vitamina hidrosoluble que solo es ligeramente soluble en agua neutra, pero se disuelve más fácilmente en soluciones calientes o alcalinas. Se puede preparar una solución madre de biotina de 1 mM en solución salina tamponada con fosfato (PBS) para ensayos bioquímicos y suplementos de cultivo celular.

Objetivo

Preparación de 10 mL de solución madre de biotina de 1 mM en PBS.

Composición

• Biotina de 1 mM (C₁₀H₁₆N₂O₃S) en PBS

Materiales necesarios

• Biotina (masa molar 244.31 g/mol)
• Solución salina tamponada con fosfato (PBS)
• NaOH de 1 N (opcional, para facilitar la disolución)
• Agua desionizada / destilada
• Tubo graduado de 15 mL con tapón de rosca
• Agitador vórtex o rotador de tubos
• Filtro de jeringa (0.22 µm) para esterilización
• Equipo de protección personal (guantes, gafas, bata de laboratorio)

Procedimiento

• Paso 1
  Pese **2.44 mg** de biotina (para 10 mL de solución madre de 1 mM). Transfiera el sólido a un tubo graduado de 15 mL.
• Paso 2
  Añada **9 mL de PBS** y mezcle (con vórtex o rotación) para disolver. Si es necesario, añada unas gotas de NaOH de 1 N para facilitar la disolución de la biotina; no la disuelva únicamente en agua pura.
• Paso 3
  Ajuste el volumen de la solución a **10 mL** con agua desionizada. Mezcle de nuevo.
• Paso 4
  Esterilice por filtración con un **filtro de jeringa de 0.22 µm** en un recipiente estéril bajo condiciones asépticas.

Conservación: Divida asépticamente en alícuotas pequeñas (p. ej., 0.5 mL o 1 mL). Conserve a **–20 °C** hasta su uso para mantener la estabilidad.

Reactivos disponibles