Préparation du tampon TE

Le tampon Tris-EDTA (TE) est un système tampon largement utilisé pour conserver et stabiliser l'ADN et l'ARN en maintenant le pH et en inhibant l'activité des nucléases.

Tampon Tris-EDTA (TE) – Composition de la solution de travail 1X

Applications du tampon Tris-EDTA

Le tampon Tris-EDTA est principalement utilisé pour conserver, diluer et stabiliser l'ADN et l'ARN. Le Tris maintient un pH stable, tandis que l'EDTA chélate les ions métalliques divalents tels que Mg²⁺ et Ca²⁺, contribuant à inhiber les nucléases dépendantes des métaux. L'EDTA n'inhibe pas de manière fiable les RNases indépendantes des métaux, comme la RNase A. Le tampon TE est largement utilisé dans les procédures de biologie moléculaire, notamment l'extraction des acides nucléiques, le clonage, le séquençage et la conservation prolongée de l'ADN.

Conseils de préparation, stérilisation et conservation

• À strictement parler, un pH de 7.5 est préférable pour l'ARN, tandis qu'un pH de 8.0 est couramment utilisé pour l'ADN ; toutefois, un pH de 8.0 convient généralement aux deux.
• Le pH des solutions de Tris est sensible à la température. Toujours ajuster le pH à température ambiante.
• Il est recommandé de vérifier périodiquement le pH pour s'assurer de la stabilité du tampon.
• La stérilisation par filtration à 0.2 μm ne garantit pas l'élimination ou l'inactivation complète de toutes les DNases.
• L'ADN génomique et plasmidique peut être conservé à court terme dans le tampon TE à 4°C, ou à long terme entre −20°C et −80°C. Éviter les cycles répétés de congélation-décongélation.
• L'EDTA (acide libre) est extrêmement difficile à dissoudre ; il est recommandé de préparer à l'avance une solution mère d'EDTA.
• Stérilisation : autoclavage.
• Conservation : température ambiante.