Preparo do tampão de corrida SDS-PAGE
Este guia descreve o preparo de um tampão de corrida para SDS-PAGE em uma molaridade definida para uso em laboratório.
O tampão de corrida para SDS-PAGE é um tampão de eletroforese padrão usado em sistemas Laemmli para separar proteínas em condições desnaturantes.
Tampão de corrida para SDS-PAGE – Composição da solução de trabalho 1X
| Nome | Fórmula | Concentração (1X) | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris base | C₄H₁₁NO₃ | 25 mM | 77-86-1 |
| Glicina | NH₂CH₂COOH | 192 mM | 56-40-6 |
| SDS | C₁₂H₂₅O₄NaS | 0.1% (w/v) | 151-21-3 |
Aplicações do tampão de corrida para SDS-PAGE
O tampão de corrida para SDS-PAGE é usado para eletroforese de proteínas em condições desnaturantes. Em combinação com tampão de amostra contendo SDS e géis de poliacrilamida, permite que as proteínas migrem principalmente de acordo com o peso molecular, mantendo uma relação uniforme entre carga negativa e massa.
Dicas de preparo, esterilização e armazenamento
- O pH da solução deve ser 8.3 e não requer nenhum ajuste.
- O SDS forma espuma com facilidade. Ao adicionar água, deixá-la escorrer lentamente pela parede do recipiente para minimizar a formação de espuma e evitar agitação vigorosa.
- O SDS pode formar precipitados floculentos em temperaturas baixas. Garantir que esteja totalmente dissolvido antes do uso.
- Esterilização: geralmente não é necessária; decidir conforme a necessidade.
- Armazenamento: temperatura ambiente.
Prévia
