오르토바나데이트나트륨 원액 조제 가이드

원액 조제 가이드 - 0.2 M 오르토바나데이트 나트륨(Na₃VO₄) 용액

오르토바나데이트 나트륨(Na₃VO₄)은 생화학 실험에서 **포스파테이스 억제제**로 널리 사용되며, 일반적으로 **200 mM(0.2 M) 원액**으로 조제합니다. 억제 활성을 최대화하려면 pH 조정과 가열(끓임)을 반복해 활성화(탈중합)하여 pH 10에서 무색이고 안정한 상태를 유지해야 합니다.

목적

세포 용해 버퍼 또는 효소 분석에 사용할 **0.2 M 오르토바나데이트 나트륨 원액 20 mL**를 조제합니다.

구성

• 0.2 M(200 mM) 농도의 오르토바나데이트 나트륨(Na₃VO₄) 탈이온수/Milli-Q water 용액

필요 재료

• 오르토바나데이트 나트륨(Na₃VO₄) 고체
• 6 M 염산(HCl) 또는 1 M HCl
• 탈이온수 / Milli-Q water
• 50 mL 스크류캡 폴리프로필렌 튜브 또는 적절한 용기
• 전자레인지 또는 끓는 물중탕
• pH 10 측정 가능한 pH 미터 또는 pH 시험지
• 메스피펫/마이크로피펫
• PPE(장갑, 고글, 실험복)

조제 절차

• Step 1
  50 mL 스크류캡 튜브에 오르토바나데이트 나트륨(MW = 183.91) **0.736 g**을 칭량합니다. 탈이온수/Milli-Q water **15 mL**를 넣고 반전 혼합하여 용해시킵니다(약 5분).
• Step 2
  6 M HCl을 사용해 용액 pH를 **10.0**으로 맞춥니다(혼합하면서 약 10 µL씩 점적). 조정 전 pH는 약 13.5일 수 있으며, 산을 넣으면 용액이 노랗게 변할 수 있습니다.
• Step 3
  끓는 물중탕 또는 전자레인지에서 짧게 반복 가열하여 용액이 **무색**이 될 때까지 처리한 뒤 실온으로 냉각합니다.
• Step 4
  냉각 후 pH를 다시 **10.0**으로 맞추고 가열/냉각 사이클을 반복합니다. 냉각 후에도 용액이 무색이고 pH 10에서 안정할 때까지 이 과정을 **2-3회** 수행합니다.
• Step 5
  탈이온수/Milli-Q water를 추가해 최종 부피를 **20 mL**로 맞추고 반전 혼합합니다.

Note: 반복적인 pH 조정 및 가열 과정은 중합된 바나데이트 종을 제거해 활성화된 무색 오르토바나데이트 원액을 얻는 데 필요합니다. 소분액에는 농도와 활성화 날짜를 표기하고 소량(예: 0.5-1 mL)으로 나누어 **−20 °C** 보관하세요. 재착색되거나 pH가 변하면 폐기하세요.

사용 가능한 시약