オルトバナジン酸ナトリウム ストック溶液

ストック溶液調製ガイド – オルトバナジン酸ナトリウム 0.2 M（Na₃VO₄）

オルトバナジン酸ナトリウム（Na₃VO₄）は、生化学実験で広く使われる **ホスファターゼ阻害剤**で、通常 **200 mM（0.2 M）** ストックとして調製されます。 阻害活性を最大化するには、pH 調整と加熱を繰り返して重合バナデートを解離させ、 pH 10 で無色かつ安定な状態に活性化する必要があります。

目的

細胞溶解バッファーや酵素アッセイ用に、**0.2 M オルトバナジン酸ナトリウム溶液 20 mL** を調製する。

組成

• 0.2 M（200 mM）オルトバナジン酸ナトリウム（Na₃VO₄）/ 脱イオン水または Milli‑Q 水

必要な試薬・器具

• オルトバナジン酸ナトリウム（Na₃VO₄）固体
• 6 M 塩酸（HCl）または 1 M HCl
• 脱イオン水 / Milli‑Q 水
• 50 mL ねじ蓋付きポリプロピレンチューブ
• 電子レンジまたは沸騰水浴
• pH メーター（または pH 10 まで測定可能な試験紙）
• ピペット・マイクロピペット
• 個人防護具（手袋・保護眼鏡・白衣）

手順

• Step 1
  50 mL チューブに Na₃VO₄ を **0.736 g**（MW = 183.91）秤量し、 脱イオン水または Milli‑Q 水 **15 mL** を加えて反転混和し、溶解させます（約 5 分）。
• Step 2
  6 M HCl を滴下して pH を **10.0** に調整します（混和しながら 10 µL 程度ずつ）。 初期 pH は約 13.5 で、酸添加時に黄色化することがあります。
• Step 3
  溶液を沸騰水浴または電子レンジで短時間ずつ加熱し、**無色**になるまで処理した後、 室温まで冷却します。
• Step 4
  冷却後に再度 pH **10.0** へ調整し、加熱/冷却サイクルを繰り返します。 冷却後も無色・pH 10 で安定するまで **2–3 回** 実施します。
• Step 5
  脱イオン水または Milli‑Q 水で最終体積を **20 mL** に合わせ、反転混和します。

注意: pH 調整と加熱の反復により重合バナデート種が減少し、 活性な無色オルトバナデートストックが得られます。濃度・活性化日を明記して 0.5–1 mL 程度で分注し、**−20 °C** 保存してください。再着色や pH 変動がある場合は廃棄します。

利用可能な試薬