황산암모늄 기반 PCR 버퍼는 프라이머 특이성을 높이고 DNA 중합효소 활성을 최적화하는 데 널리 사용됩니다.
황산암모늄 기반 PCR 버퍼 - 조성
| 성분명 | 화학식 | 농도 | CAS |
|---|---|---|---|
| 황산암모늄 | (NH₄)₂SO₄ | 20 mM | 7783-20-2 |
| Tris-Cl (pH 8.8) | C₄H₁₁NO₃ | 75 mM | 77-86-1 |
| 염화마그네슘 | MgCl₂ | 2 mM | 7791-18-6 |
| Triton X-100 | C₃₄H₆₂O₁₁ | 0.1% (w/v) | 9002-93-1 |
멸균 및 보관
- 멸균: 0.22 μm 여과.
- 보관: 소분 후 −20°C 보관.
주의사항
- 버퍼 pH는 일반적으로 8.0-9.5이며 Tris-Cl로 조정합니다.
- Triton X-100은 점도가 매우 높으므로 저농도 원액을 사용하거나 Tween 20으로 대체하세요.
- 황산암모늄을 사용할 때는 MgCl₂ 농도가 일반적으로 더 높습니다(2.0 ± 0.5 mM).
- NH₄⁺와 Mg²⁺는 길항 작용을 보이며, 황산암모늄 기반 버퍼는 Mg²⁺ 농도 범위 전반에서 프라이머 특이성이 더 높게 나타납니다.
- 암모늄 이온은 불일치 프라이머-템플릿 수소결합을 불안정화해 반응 특이성을 높여줍니다.
- 최적 PCR 버퍼는 DNA 중합효소 종류에 따라 달라지므로 제조사 권장 조건을 따르세요.
- 무수 MgCl₂를 직접 사용할 경우 발열하므로, 용매 일부에 소량씩 나누어 넣으세요.
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