ストック溶液調製ガイド — IPTG
IPTG(Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside)は乳糖アナログで、 分子生物学では lac/tac プロモーター下の大腸菌組換えタンパク質発現誘導に広く使われます。 lacリプレッサーに結合してオペレーターから解離させ、下流遺伝子の転写を可能にします。 クローニングでの青白選択にも用いられます。
化学情報
| 名称 | 分子式 | 分子量 | CAS |
|---|---|---|---|
| IPTG | C₉H₁₈O₅S | 238.3 g/mol | 367-93-1 |
用途
- 大腸菌でのタンパク質発現誘導
- 青白選択による陽性クローン判定
溶解性と取り扱い
- IPTGは白色結晶粉末で、水に溶けやすい性質があります。
- ストック調製にはヌクレアーゼフリー水と無菌操作を使用してください。
- IPTG溶液は加熱で分解するため、オートクレーブ滅菌は不可です。
ストック溶液調製
1 M IPTGストック溶液の調製例:
IPTG粉末 2.38 g を秤量し、約8 mLの脱イオン水に加える。
完全に溶解するまで混和する。
脱イオン水で最終体積10 mLに定容し、十分に混合する。
完全に溶解するまで混和する。
脱イオン水で最終体積10 mLに定容し、十分に混合する。
滅菌と保存
- 0.22 µmフィルターで滅菌ろ過し、無菌容器へ回収します。
- 凍結融解の反復を避けるため、0.5–1 mL程度に小分け分注します。
- 分注後は−20 °Cで長期保存します。
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