ストック溶液調製ガイド — EGTA
EGTA(Ethylene Glycol Tetraacetic Acid)は、遊離Ca2+濃度を制御するために 生化学・細胞生物学実験で使われる高選択的なカルシウムキレート剤です。EGTAはマグネシウムより カルシウムに高い親和性を示すため、カルシウム選択的なキレートが必要な緩衝系で有用です。
化学特性
- CAS番号:67-42-5
- 分子式:C14H24N2O10
- 分子量:380.35 g/mol
溶解性と取り扱い
EGTAは中性水中での溶解性が低く、通常はNaOH添加などのアルカリ条件で完全溶解させます。 実務上は、先にアルカリ側に調整した水へ溶かすか、濃NaOH少量で溶解後に希釈して使います。
- アルカリ性水溶液では溶けやすく、pHが下がると沈殿が生じる場合があります。
- 中性pHでは溶解性が低いため、加温や超音波処理で溶解を補助できます。
ストック溶液調製
以下は一般的なモル濃度でEGTAストックを調製する際の参考値です。必要に応じて、実ロットの分子量に合わせて補正してください。
1 mM:1 mgあたり 2.63 mL
5 mM:1 mgあたり 0.53 mL
10 mM:1 mgあたり 0.26 mL
5 mM:1 mgあたり 0.53 mL
10 mM:1 mgあたり 0.26 mL
溶解後、必要ならpHを調整し、緩衝液または水で定容します。細胞用途では必要に応じて滅菌ろ過してください。
保存と使用
- ストック溶液は分注して2〜8°Cで数か月保存できます。
- 凍結融解の繰り返しは避け、使用直前に作業濃度へ希釈してください。
- 細胞実験用途では無菌操作とろ過を行い、汚染を防いでください。
用途
EGTAは、生化学アッセイでのカルシウムキレート、カルシウム制御バッファーの作製、細胞生物学研究における 細胞内外Ca2+濃度の調節に広く使用されます。カルシウムに対する高い選択性により、Mgとの選択的分離が必要な系で特に有効です。
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