塩化カリウム系PCRバッファーはDNAポリメラーゼ活性の最適化に一般的に使用されます。
塩化カリウム系PCRバッファー — 組成
| 名称 | 化学式 | 濃度 | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris-Cl (pH 9.0) | C₄H₁₁NO₃ | 10 mM | 77-86-1 |
| 塩化カリウム | KCl | 50 mM | 7447-40-7 |
| 塩化マグネシウム | MgCl₂ | 1.5 mM | 7791-18-6 |
| Triton X-100 | C₃₄H₆₂O₁₁ | 0.1% (w/v) | 9002-93-1 |
滅菌と保存
- 滅菌：0.22 μmろ過。
- 保存：分注して−20°Cで保存。
ポイント
- バッファーpHは通常8.0〜9.5で、Tris-Clで調整します。
- Triton X-100は粘度が高いため、低濃度ストックを使用するかTween 20で代替します。
- KCl系PCRバッファーではMgCl₂濃度は低め（約1.5 ± 0.25 mM）になることが多いです。
- 最適なPCRバッファーはDNAポリメラーゼに依存するため、酵素供給元の推奨に従ってください。
- 無水MgCl₂の直接使用は発熱するため、溶媒の一部に少量ずつ加えてください。
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