Préparation d'une solution mère de EGTA
Ce guide décrit la préparation d'une solution mère d'EGTA à une molarité définie pour une utilisation en laboratoire.
Guide de préparation des solutions mères – EGTA
L’EGTA (acide éthylèneglycoltétraacétique) est un chélateur très sélectif des ions calcium, utilisé dans les expériences de biochimie et de biologie cellulaire pour contrôler les concentrations de Ca2+ libre. L’EGTA lie les ions calcium avec une affinité bien supérieure à celle pour le magnésium, ce qui le rend utile pour les applications de tamponnage et de chélation nécessitant une séquestration spécifique du calcium.
Propriétés chimiques
- Numéro CAS : 67-42-5
- Formule moléculaire : C14H24N2O10
- Masse molaire : 380.35 g/mol
Solubilité et manipulation
L’EGTA est peu soluble dans l’eau et nécessite généralement des conditions alcalines (par exemple, l’ajout de NaOH) pour se dissoudre complètement. En pratique, les solutions mères sont d’abord préparées dans de l’eau ajustée à un pH basique pour assurer la dissolution, ou dans de petits volumes de NaOH concentré, puis diluées.
- Soluble dans les solutions aqueuses alcalines ; une précipitation peut se produire si le pH diminue.
- Solubilité limitée dans l’eau à pH neutre ; le réchauffement et la sonication peuvent faciliter la solubilisation.
Préparation de la solution mère
Voici des exemples de volumes pour préparer des solutions mères d’EGTA aux molarités courantes. Ajuster les quantités selon la masse molaire exacte du lot si nécessaire.
5 mM : 0.53 mL pour 1 mg
10 mM : 0.26 mL pour 1 mg
Après dissolution, ajuster le pH si nécessaire, compléter au volume final avec du tampon ou de l’eau, et stériliser la solution par filtration au besoin.
Conservation et utilisation
- Les solutions mères peuvent être réparties en aliquotes et conservées à 2-8°C pendant plusieurs mois.
- Éviter les cycles répétés de congélation–décongélation ; préparer les dilutions de travail juste avant utilisation.
- Utiliser des techniques stériles et la filtration pour éviter la contamination lors des applications de culture cellulaire.
Applications
L’EGTA est couramment utilisé pour chélater le calcium dans les dosages biochimiques, préparer des tampons à teneur contrôlée en calcium et moduler les taux de Ca2+ intracellulaires ou extracellulaires dans les études de biologie cellulaire. Sa forte sélectivité pour le calcium par rapport au magnésium le rend particulièrement utile lorsqu’une chélation différentielle des ions est nécessaire.
